蛋白快速染色液(免脫色)用戶指南
產(chan) 品概述
蛋白快速染色液(免脫色)是一款專(zhuan) 為(wei) 科研工作者設計的高效蛋白質染色試劑。該產(chan) 品顯著縮短了傳(chuan) 統蛋白染色流程所需的時間,同時省略了繁瑣的脫色步驟,在保證高靈敏度和分辨率的前提下,極大地提高了實驗效率,適用於(yu) SDS - PAGE(十二烷基硫酸鈉 - 聚丙烯酰胺凝膠電泳)等多種蛋白分離凝膠的染色分析。
技術原理
本染色其中的染色成分能夠特異性地與(yu) 蛋白質分子結合。在染色過程中,染色劑通過靜電作用、疏水作用以及範德華力等多種分子間作用力,迅速且牢固地附著於(yu) 蛋白質條帶之上。與(yu) 傳(chuan) 統染色方法不同的是,該染色液中的添加劑能夠抑製背景染色,使得蛋白質條帶在凝膠背景中清晰呈現,無需額外的脫色步驟來去除背景雜色,從(cong) 而實現快速、高對比度的染色效果。
產(chan) 品特點
00001. 快速染色:相較於(yu) 傳(chuan) 統染色方法數小時甚至過夜的染色時間,本染色液可大大節省實驗時間。
00001. 免脫色:創新配方使染色過程中背景染色得到有效控製,無需後續脫色操作,避免了因脫色過度或不足對實驗結果造成的影響,同時減少了實驗操作步驟和試劑消耗。
00001. 高靈敏度:能夠檢測到的蛋白質含量,可清晰分辨出不同分子量的蛋白質條帶,滿足科研對微量蛋白檢測的需求。
00001. 兼容性強:適用於(yu) 各種常見的聚丙烯酰胺凝膠濃度,包括不同比例的分離膠和濃縮膠,且與(yu) 多種蛋白樣品製備方法兼容。
使用方法
染色前準備
00001. 完成 SDS - PAGE 電泳後,小心取出凝膠,放入合適的染色容器中。建議使用塑料或玻璃容器,避免使用金屬容器以防染色液發生化學反應。
00001. 準備適量的蛋白快速染色液。根據凝膠的大小和數量,按照每平方厘米凝膠麵積使用比例進行準備。
染色步驟
00001. 將準備好的蛋白快速染色液緩慢倒入裝有凝膠的容器中,確保凝膠浸沒在染色液中。染色液應覆蓋凝膠表麵以保證染色均勻。
00001. 將容器置於(yu) 水平搖床上,設置轉速,在室溫下染色。染色過程中,染色液中的成分會(hui) 逐漸與(yu) 蛋白質結合,蛋白質條帶將開始顯現。
結果觀察與(yu) 記錄
00001. 染色完成後,直接將凝膠從(cong) 染色液中取出,置於(yu) 凝膠成像係統或透射式紫外分析儀(yi) 下觀察。此時,蛋白質條帶應清晰可見,背景幹淨。
00001. 使用凝膠成像軟件對結果進行拍照記錄。調整合適的曝光時間、對比度和亮度等參數,以獲取清晰、準確反映蛋白質條帶信息的圖像。建議保存原始圖像文件,以便後續分析。
注意事項
00001. 染色液具有一定的腐蝕性,使用時需佩戴手套、護目鏡等防護裝備,避免皮膚和眼睛直接接觸。如不慎接觸,應立即用大量清水衝(chong) 洗,並及時就醫。
00001. 染色液應避光保存於(yu) 4℃冰箱中,使用前需恢複至室溫。避免反複凍融,以免影響染色效果。
00001. 不同品牌和批次的凝膠可能對染色效果有輕微影響。若使用新的凝膠產(chan) 品,建議進行預實驗以優(you) 化染色條件。
00001. 染色後的凝膠和剩餘(yu) 染色液應按照實驗室化學廢棄物處理規定進行妥善處理,避免對環境造成汙染。
常見問題及解決(jue) 方法
00001. 染色條帶不清晰:可能原因是染色時間不足或染色液濃度過低。可適當延長染色時間,或按照說明書(shu) 比例增加染色液濃度後重新染色。
00001. 未檢測到目標蛋白條帶:檢查蛋白上樣量是否過低,可適當增加上樣量並重做實驗。同時確認目標蛋白是否表達異常,可通過其他方法如 Western blot 進行驗證。
通過正確使用本蛋白快速染色液(免脫色),科研人員能夠高效、準確地對蛋白質進行染色分析,為(wei) 科研工作提供有力支持。