蛋白快速染液（免脫色）科研應用指南

——高效、靈敏的蛋白檢測解決(jue) 方案

一、產(chan) 品原理與(yu) 核心優(you) 勢

1.1 技術原理

熒光/比色雙模式檢測：

含特殊染料（如SYPRO Ruby或Coomasie衍生物），可逆性結合蛋白的 疏水區域

線性動態範圍：0.5-50 ng/band（比傳(chuan) 統考馬斯亮藍靈敏10倍）

免脫色設計：

染色-洗滌一步完成（省去甲醇/乙酸脫色步驟）

兼容下遊質譜分析（無醛類交聯劑）

1.2 關(guan) 鍵性能對比

參數免脫色染液傳(chuan) 統考馬斯亮藍銀染

檢測時間15分鍾2小時+脫色過夜4小時

靈敏度0.5 ng10 ng0.1 ng

質譜兼容性優(you) 秀差中等

1.3 適用場景

推薦用途：

✓ SDS-PAGE/WB快速質檢

✓ 低豐(feng) 度蛋白可視化

✓ 高通量篩選實驗

二、標準化操作流程

2.1 染色步驟

複製

1. 電泳後凝膠處理：  

   - 去除SDS：用超純水漂洗2×5分鍾  

2. 染色：  

   - 加入染液（覆蓋凝膠），室溫搖床孵育10分鍾  

3. 洗滌：  

   - 換超純水搖洗5分鍾（去除背景）  

4. 成像：  

   - 藍光激發（SYPRO Ruby）或直接可見光觀察  

2.2 注意事項

凝膠厚度：建議≤1 mm（過厚凝膠需延長染色5分鍾）

染色液回收：可重複使用3次（靈敏度下降≤20%）

三、數據解讀與(yu) 優(you) 化

3.1 結果判讀標準

陽性信號：清晰條帶（無橫向拖尾）

背景控製：凝膠非蛋白區域接近無色

3.2 常見問題排查

現象可能原因解決(jue) 方案

條帶模糊SDS未去除延長水洗至10分鍾

背景過高染色時間過長縮短至5-7分鍾

信號弱蛋白量不足/染料失效增加上樣量/更換新染液

四、技術問答（Q&A）

Q1：能否用於(yu) Native-PAGE？

需改用 非變性專(zhuan) 用染液（如F90100NT），避免SDS幹擾

Q2：染色後能否回收蛋白？

可切膠進行 膠內(nei) 酶解（需用50mM NH₄HCO₃充分洗滌）

文檔優(you) 化建議：

插入 【染色效果對比圖】（標記不同靈敏度）

添加 染色時間計算器 二維碼（根據凝膠厚度調整）

關(guan) 鍵步驟標注 ⚠️警示（如"避免金屬器皿接觸"）