Roche 11365177001羅氏試劑N-Glycosidase用戶指南

摘要：本指南聚焦於(yu) Roche 11365177001羅氏試劑N-Glycosidase，旨在為(wei) 科研人員提供全麵且易懂的使用指引。詳細介紹了產(chan) 品基本信息、特性、作用機製、應用場景、操作流程、注意事項以及性能參數等內(nei) 容，助力科研人員高效、準確地開展糖基化蛋白質分析相關(guan) 實驗。
關(guan) 鍵詞：Roche 11365177001；N-Glycosidase；糖基化蛋白質分析；用戶指南

一、引言

在生物醫學研究的廣闊領域中，糖基化蛋白質分析占據著舉(ju) 足輕重的地位。糖基化作為(wei) 蛋白質最常見的翻譯後修飾之一，對蛋白質的結構、功能和定位有著深遠影響，與(yu) 眾(zhong) 多生理和病理過程密切相關(guan) 。Roche 11365177001羅氏試劑N-Glycosidase憑借其性能，成為(wei) 糖基化蛋白質分析的得力工具。本文將詳細介紹該試劑的相關(guan) 信息，以幫助科研人員更好地利用它開展研究工作。

二、產品概述

（一）基本信息

• 品牌：Roche/羅氏

• 產(chan) 品名稱：N-Glycosidase F

• 貨號：11365177001

• 規格：250 U（0.25 ml）

• 儲(chu) 存溫度：−20°C

• 最佳pH：7.0 - 8.0

• 質量水平：100

• 純度測定：≥90%（SDS-PAGE）

• 比活性：約25000 units/mg protein

（二）化學性質

N-Glycosidase F是一種肽-N-糖苷酶 F，也被稱為(wei) 肽-N 4-(乙酰-β-氨基葡萄糖)-天冬酰胺酰胺酶。它可溶於(yu) 50 mM磷酸鈉、含12.5 mM EDTA、50%甘油（v/v）的溶液中，pH為(wei) 7.2。

三、產品特性

（一）高特異性

N-Glycosidase F能夠特異性識別並去除N-連接糖基化蛋白質的GlcNAc殘基，不會(hui) 對其他類型的糖基化或蛋白質結構造成影響。這種高特異性確保了實驗結果的準確性和可靠性，使得科研人員能夠專(zhuan) 注於(yu) 研究N-連接糖基化蛋白質的相關(guan) 特性。

（二）高活性

羅氏采用的酶穩定技術，使N-Glycosidase F在較寬的溫度和pH範圍內(nei) 保持高活性。同時，其快速的反應速度大大縮短了實驗周期，提高了科研效率。例如，一個(ge) 單位的酶活性是在pH 7.8、37°C下1分鍾內(nei) 水解1 nmol二甲氨基偶氮苯甲酰纖維蛋白糖肽或0.2 nmol丹磺酰胎球蛋白糖肽。

（三）高純度

通過嚴(yan) 格的生產(chan) 工藝和質量控製，N-Glycosidase F的純度高達99%以上，有效避免了雜質對實驗結果的幹擾。高純度的試劑能夠提供更清晰、更準確的實驗數據，為(wei) 科研人員的深入研究奠定堅實基礎。

（四）方便易用

該試劑采用即用型設計，無需複雜的預處理步驟，直接加入樣品中即可開始反應。同時，羅氏還提供了詳細的實驗指南和技術支持，確保用戶能夠輕鬆上手，順利開展實驗。

四、作用機製

N-Glycosidase F能夠切割所有類型的天冬酰胺結合N-聚糖，前提是氨基和羧基以肽鍵連接，並且寡糖具有最小長度的殼二糖核心單位。其反應產(chan) 物為(wei) 氨、天冬氨酸（肽鏈中）和完整的寡糖。通過這種作用機製，N-Glycosidase F可以將糖基化位點暴露出來，為(wei) 後續的質譜分析、免疫印跡等實驗提供重要幫助。

五、應用場景

（一）糖基化蛋白質功能研究

在研究糖基化蛋白質在細胞信號傳(chuan) 導、蛋白質穩定性、蛋白質相互作用等方麵的功能時，N-Glycosidase F。通過去除糖基化修飾，科研人員可以觀察蛋白質功能的變化，深入了解糖基化在蛋白質功能調控中的作用機製。

（二）藥物研發

在藥物研發領域，N-Glycosidase F可用於(yu) 分析藥物與(yu) 糖基化蛋白質的相互作用。例如，研究藥物是否會(hui) 影響糖基化蛋白質的結構和功能，以及藥物與(yu) 糖基化蛋白質的結合位點等。這些研究為(wei) 藥物作用機理的研究提供了有力支持，有助於(yu) 開發更有效的藥物。

（三）疾病機製研究

許多疾病的發生與(yu) 發展與(yu) 糖基化蛋白質的異常表達或修飾密切相關(guan) 。N-Glycosidase F可以幫助科研人員分析疾病狀態下糖基化蛋白質的變化，揭示疾病的發生機製，為(wei) 疾病的診斷和治療提供新的思路和方法。

六、操作流程

（一）準備工作

從(cong) −20°C冰箱中取出N-Glycosidase F試劑，放置在冰上緩慢解凍。準備待處理的糖基化蛋白質樣品，確保樣品的質量和濃度符合實驗要求。同時，準備好所需的緩衝(chong) 液、離心管、移液器等實驗器材。

（二）樣品處理

將適量的N-Glycosidase F試劑加入到糖基化蛋白質樣品中，輕輕混勻。根據實驗需求，確定合適的反應溫度和時間。一般來說，反應在37°C下進行，時間可根據樣品的糖基化程度和實驗目的進行調整。

（三）反應終止

反應結束後，加入適量的反應終止液（如SDS-PAGE上樣緩衝(chong) 液），將樣品煮沸5 - 10分鍾，使蛋白質變性。

（四）後續分析

將處理後的樣品進行SDS-PAGE電泳、免疫印跡、質譜分析等實驗，以檢測糖基化蛋白質的變化情況。根據實驗結果，進行數據分析和結論總結。

七、注意事項

（一）儲存條件

N-Glycosidase F試劑應儲(chu) 存在−20°C冰箱中，避免反複凍融。反複凍融會(hui) 導致酶活性降低，影響實驗結果。因此，在使用前應根據實驗需求將試劑分裝成小份，每次使用一份。

（二）實驗操作

在實驗操作過程中，要注意避免酶的汙染和失活。使用幹淨的移液器和離心管，避免交叉汙染。同時，要嚴(yan) 格按照實驗步驟進行操作，確保實驗條件的穩定性。

（三）安全防護

N-Glycosidase F是一種生物試劑，具有一定的生物安全性。在操作過程中，要佩戴實驗手套、口罩等防護用品，避免試劑接觸皮膚和眼睛。如不慎接觸，應立即用大量清水衝(chong) 洗，並及時就醫。

（四）實驗對照

為(wei) 了確保實驗結果的可靠性，應設置合適的實驗對照。例如，設置未添加N-Glycosidase F的樣品作為(wei) 陰性對照，以排除其他因素對實驗結果的影響。

八、性能參數

九、結論

Roche 11365177001羅氏試劑N-Glycosidase是一款高效、穩定、高純度的糖基化蛋白質分析試劑。其高特異性、高活性和高純度等特點，使其在糖基化蛋白質分析領域具有廣泛的應用前景。通過遵循本用戶指南中的操作流程和注意事項，科研人員可以充分利用該試劑的優(you) 勢，開展深入的糖基化蛋白質研究，為(wei) 生物醫學研究的發展做出貢獻。希望本指南能夠幫助用戶更好地使用該產(chan) 品，取得理想的實驗結果。