Q33226——Thermo Qubit4 熒光計（Qubit 4 Fluorometer）用戶指南

Q33226——Thermo Qubit4 熒光計（Qubit 4 Fluorometer）用戶指南

——精準、高效、多功能的核酸與(yu) 蛋白質定量解決(jue) 方案

一、產品概述

Qubit 4 熒光計（貨號：Q33226）是賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）推出的新一代台式熒光定量儀(yi) ，專(zhuan) 為(wei) 精準測量DNA、RNA和蛋白質濃度設計。其核心參數如下：

• 檢測範圍：10 pg/μL DNA、12.5 μg/mL 蛋白質（1 μL樣本量）

• 檢測時間：<3秒/樣本（DNA/RNA/蛋白質），<5秒/RNA完整性（RNA IQ法）

• 動態範圍：5個(ge) 數量級

• 光源：藍光LED（470 nm）、紅光LED（635 nm）

• 激發/發射濾光片：藍光（430–495 nm激發，510–580 nm發射）、紅光（600–645 nm激發，665–720 nm發射）

• 檢測器：光電二極管（300–1000 nm）

• 顯示與(yu) 存儲(chu) ：5.7英寸彩色觸摸屏，最多存儲(chu) 1000個(ge) 樣本數據

• 連接性：USB、WiFi、U盤

二、技術優勢

1. 高靈敏度與(yu) 特異性

• 熒光染料：僅(jin) 與(yu) 目標分子（DNA、RNA、蛋白質）結合後發射熒光，避免遊離核苷酸或降解核酸的幹擾。

• 低濃度檢測：可精確檢測低至10 pg/μL的DNA和12.5 μg/mL的蛋白質，適用於(yu) 珍貴或低濃度樣品。

2. 快速與(yu) 便捷

• RNA IQ法：5分鍾內(nei) 完成RNA完整性和質量檢測，較傳(chuan) 統微流體(ti) 芯片法（如Agilent 2100）縮短85%時間。

• 操作簡化：僅(jin) 需將樣品加入工作液，混合後放入儀(yi) 器檢測，無需複雜預處理。

3. 多功能與(yu) 擴展性

• 內(nei) 置試劑計算器：自動計算所需染料和緩衝(chong) 液用量，減少人為(wei) 誤差。

• 個(ge) 性化檢測：支持MyQubit軟件自定義(yi) 檢測程序，可定量膽固醇、葡萄糖等小分子。

4. 數據管理與(yu) 導出

• 多語言界麵：支持中、英、法、德等7種語言。

• 數據傳(chuan) 輸：通過USB、WiFi或U盤導出數據，兼容Thermo Fisher Connect雲(yun) 平台。

三、操作指南

（一）實驗前準備

1. 設備檢查

• 確保儀(yi) 器放置在平穩、幹燥的台麵上，避免陽光直射。

• 檢查電源適配器、USB驅動器（4 GB）、屏幕擦拭布是否齊全。

2. 試劑準備

• 使用Qubit試劑盒（如dsDNA HS、RNA IQ等），按說明書(shu) 稀釋工作液。

• 確保試劑在有效期內(nei) （6個(ge) 月內(nei) ），且避光保存。

3. 樣本準備

• DNA/RNA/蛋白質樣本需純化，避免鹽類、酚類等抑製劑幹擾。

• 樣本量建議1–20 μL，濃度超出範圍時可稀釋後檢測。

（二）實驗操作

1. 開機與(yu) 預熱

• 連接電源適配器，按下電源鍵，預熱時間<35秒。

2. 選擇檢測程序

• 觸摸屏選擇對應試劑盒類型（如dsDNA HS、RNA IQ）。

• 如需自定義(yi) 檢測，使用MyQubit軟件創建.qbt文件並上傳(chuan) 。

3. 樣本檢測

• 將樣本加入工作液，混合後轉移至Qubit檢測管。

• 將檢測管放入儀(yi) 器，點擊“Read Tube"，3–5秒後顯示結果。

4. 數據記錄與(yu) 導出

• 結果顯示濃度值（ng/μL或μg/μL）及質量評分（如RNA IQ#）。

• 通過USB或WiFi導出數據至Excel或Thermo Fisher Connect。

（三）實驗後維護

1. 清潔與(yu) 消毒

• 使用屏幕擦拭布清潔觸摸屏，避免液體(ti) 接觸儀(yi) 器內(nei) 部。

• 檢測管可高壓滅菌或75%乙醇消毒。

2. 長期存放

• 長期不使用時，關(guan) 閉電源並覆蓋防塵罩。

四、使用技巧與高效操作

1. 樣本優(you) 化

• DNA/RNA：建議濃度範圍10–1000 pg/μL（DNA）或0.5–1.5 μg/μL（RNA）。

• 蛋白質：使用BCA法或Bradford法預估濃度，避免過高導致熒光淬滅。

2. RNA完整性檢測

• RNA IQ法區分完整RNA（RNA IQ# >7）與(yu) 降解RNA（RNA IQ#<4），適用於(yu) qPCR或NGS實驗前的質量評估。

3. 多通道檢測

• 可同時運行多個(ge) 檢測程序（如dsDNA HS與(yu) RNA IQ），提高通量。

五、注意事項

1. 安全規範

• 避免接觸熒光染料，如不慎接觸，立即用大量清水衝(chong) 洗。

• 儀(yi) 器僅(jin) 供科研使用，不可用於(yu) 臨(lin) 床診斷。

2. 操作細節

• 確保檢測管無氣泡，否則可能導致讀數偏低。

• 避免在高溫或高濕環境下使用，可能影響熒光信號。

3. 故障排除

• 結果異常：檢查試劑是否過期、樣本是否稀釋過度。

• 儀(yi) 器無響應：重啟儀(yi) 器，如仍無法解決(jue) ，聯係技術支持。

六、用戶評價與支持

• 用戶反饋：

• “Qubit 4的RNA IQ法顯著縮短了RNA質量評估時間，為(wei) NGS實驗節省了大量成本。"

• “內(nei) 置試劑計算器極大減少了人為(wei) 誤差，適合高通量實驗室。"