Eaivelly 人細胞凋亡抑製因子 ELISA Kit 用戶指南

Eaivelly 人細胞凋亡抑製因子 ELISA Kit 用戶指南

——精準定量細胞凋亡抑製因子的科研利器

一、產品概述

Eaivelly 人細胞凋亡抑製因子 ELISA Kit 是基於(yu) 雙抗體(ti) 夾心法（Sandwich ELISA）的定量檢測試劑盒，專(zhuan) 為(wei) 科研單位設計，用於(yu) 人血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yang) 上清液及尿液 中細胞凋亡抑製因子（IAP）的精準定量分析。該試劑盒通過 高效、靈敏、特異的抗體(ti) 結合酶聯反應，生成與(yu) 目標蛋白濃度成正比的顏色信號，支持 0.2 IU/L 至 6 IU/L 的檢測範圍，靈敏度達 3 pg/mL（具體(ti) 批次可能略有差異）。

二、核心組件與參數

三、技術優勢

1. 高效靈敏

• 采用 高效價(jia) 、高特異性抗體(ti) ，檢測限低至 3 pg/mL，確保低豐(feng) 度蛋白的精準捕獲。

• 重複性 CV% < 9%（批內(nei) ） 和 < 11%（批間），保證實驗結果穩定性。

2. 廣泛適用性

• 支持多種樣本類型，包括 血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yang) 上清液及尿液，滿足不同研究需求。

• 吸附性能優(you) 異，固相載體(ti) 空白值低，孔底透明度高，確保顯色均勻。

3. 節省成本

• 預包被板設計減少人工包被步驟，降低操作難度與(yu) 試劑消耗。

• 試劑盒提供 48 孔或 96 孔 兩(liang) 種規格，適配不同實驗規模。

四、操作流程

（一）樣本準備

1. 血清/血漿

• 室溫靜置 10-20 分鍾使血液自然凝固，2000-3000 rpm 離心 20 分鍾，取上清。

• 如需長期保存，分裝後置於(yu) -20℃ 或 -70℃，避免反複凍融。

2. 組織勻漿液

• 切割組織後，按 1:10（w/v） 加入 PBS（pH 7.4），勻漿後 2000-3000 rpm 離心 20 分鍾，取上清。

3. 細胞培養(yang) 上清液

• 直接收集上清，2000-3000 rpm 離心 20 分鍾，去除細胞碎片。

（二）標準曲線構建

1. 將標準品複溶後，用標準品稀釋液進行 2 倍梯度稀釋，得到 1800、1200、600、300、150 ng/L 的濃度梯度。

2. 在酶標包被板上設置 10 個(ge) 標準孔，每孔加入 50 μL 稀釋後的標準品。

（三）加樣與孵育

1. 在待測樣品孔中加入 40 μL 樣品稀釋液 和 10 μL 樣本（稀釋 5 倍）。

2. 每孔加入 50 μL 酶標試劑，空白孔僅(jin) 加稀釋液與(yu) 酶標試劑。

3. 用封板膜密封後，37℃ 孵育 30 分鍾。

（四）洗滌與顯色

1. 棄去液體(ti) ，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒後棄去，重複 5 次。

2. 每孔加入 50 μL 顯色劑 A 和 B，輕輕震蕩混勻，37℃ 避光顯色 15 分鍾。

3. 每孔加入 50 μL 終止液，立即在 450 nm 波長 下測定 OD 值。

（五）結果計算

1. 以標準品濃度為(wei) 橫坐標，OD 值為(wei) 縱坐標，繪製標準曲線。

2. 根據樣品 OD 值，通過標準曲線計算實際濃度，再乘以稀釋倍數（5 倍）。

五、應用場景

1. 細胞凋亡機製研究

• 定量分析不同處理條件下 IAP 表達變化，揭示凋亡調控網絡。

2. 腫瘤生物學研究

• 評估 IAP 在腫瘤細胞中的表達水平，探索其作為(wei) 治療靶點的潛力。

3. 藥物研發

• 檢測藥物對 IAP 表達的調控作用，輔助抗凋亡藥物的篩選與(yu) 優(you) 化。

4. 疾病診斷

• 分析 IAP 在血清或組織中的異常表達，輔助相關(guan) 疾病的早期診斷。

六、注意事項

1. 樣本質量

• 避免使用溶血、脂血或高濃度 NaN₃ 的樣本，以免幹擾檢測結果。

2. 操作規範

• 加樣時間控製在 5 分鍾內(nei) ，避免因孵育時間差異導致誤差。

• 顯色反應需在 加終止液後 15 分鍾內(nei) 完成測定。

3. 試劑保存

• 未開封試劑盒需置於(yu) 2-8℃ 保存，開封後未用完的板條需密封保存。

• 濃縮洗滌液在低溫下可能結晶，使用前需 水浴加溫助溶。