
多酶混合體(ti) 係:該試劑盒包含多種經過優(you) 化配比的酶混合物,這些酶能夠特異性地作用於(yu) 腫瘤組織中的細胞外基質成分和細胞間連接蛋白。例如,其中的蛋白酶可水解細胞間的膠原蛋白和纖維連接蛋白,而核酸酶能降解組織中釋放出的 DNA,防止細胞聚集,從(cong) 而實現溫和且高效的組織解離,減少對細胞的損傷(shang) ,維持細胞的高活性和表麵抗原表位完整性。
配套緩衝(chong) 液係統:試劑盒中的緩衝(chong) 液不僅(jin) 為(wei) 酶提供了適宜的反應環境,維持 pH 值和離子強度的穩定,還能在解離過程中保護細胞免受滲透壓變化和氧化應激的影響。同時,緩衝(chong) 液中的特殊成分有助於(yu) 去除組織中的雜質,提高單細胞懸液的純度,為(wei) 後續實驗提供更優(you) 質的樣本。
廣泛的腫瘤類型適用性:該試劑盒經過大量實驗驗證,適用於(yu) 多種原發性腫瘤和異種移植物的解離,包括但不限於(yu) 乳腺癌、胰腺癌、結腸癌、肺癌等常見實體(ti) 瘤,以及黑色素瘤等皮膚腫瘤。無論是新鮮獲取的腫瘤組織樣本,還是經過短期保存的樣本,都能實現高效解離,滿足不同腫瘤研究場景的需求。
高細胞產(chan) 率與(yu) 活力:通過優(you) 化的酶解配方和溫和的解離條件,該試劑盒能夠從(cong) 腫瘤組織中獲得數量可觀的單細胞,顯著提高腫瘤細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞(TILs)的產(chan) 率。同時,細胞活力得到有效保障,活細胞比例通常可達 80% 以上,為(wei) 後續的細胞培養(yang) 、流式細胞術分析、單細胞測序等實驗提供充足且高質量的細胞來源。例如,在對乳腺癌組織的解離實驗中,與(yu) 傳(chuan) 統手工解離方法相比,使用 Tumor Dissociation Kit 獲得的單細胞數量增加了 30%,且細胞活力更高,為(wei) 深入研究乳腺癌細胞的特性和功能提供了更豐(feng) 富的樣本資源。
出色的抗原表位保留:在腫瘤研究中,準確識別和分析細胞表麵抗原對於(yu) 鑒定細胞類型、研究細胞功能以及開發免疫治療靶點至關(guan) 重要。Miltenyi Tumor Dissociation Kit 在解離過程中能最大限度地保留細胞表麵的抗原表位,確保後續基於(yu) 抗體(ti) 的檢測和分析方法(如免疫熒光染色、流式細胞術分選等)的準確性和可靠性。這使得科研人員能夠更精準地對腫瘤細胞和腫瘤微環境中的各類免疫細胞進行分型和功能研究,為(wei) 揭示腫瘤發生發展機製和開發創新治療方法提供有力支持。
操作簡便與(yu) 節省時間:試劑盒的操作流程經過精心設計,簡單易懂,即使是經驗相對較少的科研人員也能快速上手。與(yu) 傳(chuan) 統的手工解離方法(如剪刀剪碎組織後長時間酶解)相比,使用該試劑盒配合 gentleMACS Octo 等自動化組織解離設備,可將整個(ge) 解離過程縮短至 2 - 3 小時,大大節省了實驗時間和人力成本。同時,自動化設備的使用減少了人為(wei) 操作差異,提高了實驗結果的可重複性和穩定性,為(wei) 大規模腫瘤樣本處理提供了高效解決(jue) 方案。
樣本準備:新鮮獲取的腫瘤組織應盡快置於(yu) 預冷的保存液中,若不能立即進行解離,可在 4℃短暫保存,但需避免長時間放置導致組織自溶。對於(yu) 冷凍保存的腫瘤組織,需在 37℃水浴中快速解凍後進行後續處理。
組織切割:將腫瘤組織轉移至無菌培養(yang) 皿中,用無菌手術刀或剪刀將其切成約 1 - 2mm³ 的小塊,盡量保證組織塊大小均勻,以促進酶解反應的一致性。
酶解反應:將切好的組織小塊轉移至 gentleMACS C 管中,加入適量的 Tumor Dissociation Kit 中的酶混合液,確保組織塊浸沒。旋緊管蓋後,將 C 管放入 gentleMACS Octo 八通道組織解離器中,選擇針對人腫瘤組織優(you) 化的內(nei) 置程序(如 37C_h_TDK_3 等),啟動解離程序。設備會(hui) 通過機械振蕩和酶解的協同作用,在設定的時間和溫度條件下對組織進行高效解離。
細胞懸液製備:解離程序結束後,取出 C 管,將細胞懸液通過 70μm 的 MACS SmartStrainers 細胞濾網過濾至離心管中,以去除未解離的組織碎片和細胞團塊。隨後,對濾液進行離心,棄去上清液,用適量的緩衝(chong) 液重懸細胞沉澱,即可得到單細胞懸液。
細胞分析與(yu) 應用:獲得的單細胞懸液可直接用於(yu) 多種下遊實驗,如通過台盼藍染色法或細胞計數儀(yi) 檢測細胞數量和活力;利用流式細胞術對腫瘤細胞和免疫細胞進行分型和功能分析;進行單細胞測序,深入探究腫瘤細胞的基因表達譜和分子特征;用於(yu) 細胞培養(yang) ,開展腫瘤細胞的增殖、遷移、侵襲等功能實驗;還可用於(yu) 製備腫瘤類器官,模擬腫瘤的生長和發展過程,為(wei) 腫瘤藥物研發和個(ge) 性化治療提供更有效的模型。
腫瘤免疫研究:在一項關(guan) 於(yu) 腫瘤免疫逃逸機製的研究中,科研人員使用 Miltenyi Tumor Dissociation Kit 從(cong) 肺癌患者的腫瘤組織中獲得高純度的腫瘤細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞。通過流式細胞術分析,發現腫瘤微環境中存在大量免疫抑製細胞,且這些細胞表麵的某些免疫檢查點分子表達上調。進一步對這些細胞進行單細胞測序,揭示了腫瘤細胞與(yu) 免疫細胞之間複雜的相互作用網絡,為(wei) 開發針對肺癌的免疫治療新策略提供了重要理論依據。
腫瘤藥物研發:某製藥公司在開發新型抗腫瘤藥物時,利用該試劑盒將人源腫瘤異種移植物(PDX)模型的腫瘤組織解離為(wei) 單細胞懸液,然後將這些細胞接種到 96 孔板中進行藥物敏感性測試。由於(yu) 使用 Tumor Dissociation Kit 獲得的細胞活性高且表型穩定,實驗結果能夠準確反映藥物對腫瘤細胞的抑製效果,大大提高了藥物篩選的效率和準確性,加速了新型抗腫瘤藥物的研發進程。
腫瘤單細胞測序:在一項旨在繪製腫瘤單細胞圖譜的大型研究項目中,研究團隊使用 Miltenyi Tumor Dissociation Kit 對來自不同腫瘤類型和不同分期的大量腫瘤組織樣本進行解離,成功獲得了高質量的單細胞懸液。通過單細胞 RNA 測序技術,他們(men) 繪製了詳細的腫瘤單細胞圖譜,發現了一些新的腫瘤細胞亞(ya) 群及其特異性標誌物,為(wei) 深入理解腫瘤的異質性和精準治療提供了豐(feng) 富的數據資源。