在凝膠製備過程中,氣泡的產生會影響凝膠的均勻性和電泳結果,以下是一些避免產生氣泡的方法:
試劑添加與(yu) 混合
緩慢傾(qing) 倒:在配製凝膠溶液時,將試劑緩慢倒入容器中,避免快速傾(qing) 倒產(chan) 生衝(chong) 擊力,從(cong) 而減少氣泡的形成。例如,將丙烯酰胺溶液倒入緩衝(chong) 液中時,可沿容器壁緩緩倒入。
輕柔攪拌:使用磁力攪拌器或玻璃棒攪拌溶液時,速度不宜過快,以免將空氣卷入溶液中。攪拌時間也應適當,確保試劑充分混合即可,過度攪拌易產(chan) 生氣泡。若使用玻璃棒,攪拌過程中應避免玻璃棒與(yu) 容器壁或底部劇烈摩擦。
靜置脫氣:配製好的凝膠溶液可先靜置一段時間,讓溶液中可能存在的微小氣泡自然上浮到表麵並破裂。對於(yu) 一些對氣泡要求較高的實驗,可將溶液置於(yu) 真空幹燥器中進行脫氣處理,去除溶液中的溶解氧和微小氣泡。
凝膠灌注
避免溶液晃動:將凝膠溶液灌注到電泳槽或模具中時,應保持平穩操作,避免溶液晃動產(chan) 生氣泡。可使用移液器或注射器緩慢地將溶液注入,盡量減少溶液與(yu) 空氣的接觸麵積。
排除模具中的空氣:在灌注凝膠之前,要確保電泳槽或模具幹淨且幹燥。對於(yu) 有密封墊或梳子的模具,要檢查其密封性,防止空氣進入。在插入梳子時,要緩慢且垂直插入,避免帶入空氣。若梳子插入後發現有氣泡,應輕輕拔出梳子,排出氣泡後再重新插入。
環境因素控製
控製溫度:凝膠製備過程中的溫度變化可能會(hui) 導致溶液中氣體(ti) 的溶解度發生改變,從(cong) 而產(chan) 生氣泡。因此,要盡量保持環境溫度穩定,避免在溫度變化較大的場所進行凝膠製備。例如,從(cong) 冰箱中取出的試劑應在室溫下放置一段時間,使其溫度與(yu) 環境溫度一致後再使用。
降低環境濕度:高濕度環境可能會(hui) 使溶液表麵吸收空氣中的水分,影響溶液的性質,增加氣泡產(chan) 生的可能性。保持實驗環境幹燥,可使用除濕設備降低濕度,有助於(yu) 減少氣泡的產(chan) 生。