您好!歡迎訪問米兰俱乐部足球推荐计划網站!
全國服務谘詢熱線:

18501609238

當前位置:首頁 > 技術文章 > 樣品處理不當會對電泳結果產生哪些影響?

樣品處理不當會對電泳結果產生哪些影響?

更新時間:2025-05-22      點擊次數:177
樣品處理不當會在多個方麵對電泳結果產生影響,具體如下:


  • 條帶形狀異常

    • 拖尾:若樣品濃度過高,會(hui) 使蛋白質或核酸分子在凝膠中移動時相互幹擾,導致條帶拖尾。另外,樣品溶解不充分,存在未溶解的顆粒,也會(hui) 造成條帶拖尾,因為(wei) 這些顆粒會(hui) 在電泳過程中不規則移動,影響條帶的形狀。

    • 扭曲變形:處理樣品時若局部受熱或 pH 值不均勻,會(hui) 使生物大分子的結構發生改變,從(cong) 而在電場中的遷移行為(wei) 異常,導致條帶扭曲變形。例如,在蛋白質電泳中,若加入的 SDS 不均勻,會(hui) 使蛋白質分子結合的 SDS 量不同,導致其帶電情況和構象變化不一致,進而使條帶變形。

  • 條帶分辨率降低

    • 樣品未充分分離:如果在樣品處理過程中,沒有使蛋白質或核酸充分變性或解聚,那麽(me) 它們(men) 可能會(hui) 以多聚體(ti) 或複合物的形式存在,在電泳時無法按照各自的分子量大小進行有效分離,使得條帶分辨率降低,相鄰條帶難以區分。

    • 擴散現象嚴(yan) 重:樣品處理後若未及時進行電泳,或在電泳過程中樣品槽中的樣品泄漏,都會(hui) 導致樣品在凝膠中擴散,使條帶變寬,分辨率下降。例如,核酸樣品在加樣前若在室溫下放置時間過長,其在溶液中的擴散會(hui) 使加樣後形成的條帶變模糊。

  • 條帶缺失或信號減弱

    • 樣品降解:在樣品收集、保存或處理過程中,若受到核酸酶、蛋白酶等的作用,會(hui) 導致核酸或蛋白質降解。例如,在提取 RNA 時,若實驗環境中存在 RNA 酶,會(hui) 使 RNA 被降解,在電泳結果中表現為(wei) 條帶缺失或信號減弱。

    • 樣品損失:在樣品處理的各個(ge) 環節,如轉移、離心等過程中,若操作不當,可能會(hui) 導致樣品的丟(diu) 失。例如,在吸取樣品時,移液器操作不準確,可能會(hui) 少吸取部分樣品,或者在離心過程中,離心管破裂導致樣品損失,最終使電泳條帶信號減弱甚至缺失。

  • 非特異性條帶出現

    • 雜質幹擾:處理樣品時,如果混入了其他雜質,如在細胞裂解過程中未去除幹淨的細胞碎片、培養(yang) 基成分等,這些雜質可能會(hui) 在電泳過程中與(yu) 目標生物大分子一起遷移,形成非特異性條帶,幹擾對結果的分析。

    • 化學反應產(chan) 生異常產(chan) 物:樣品處理過程中,若發生了一些非預期的化學反應,如蛋白質的氧化、糖基化等,可能會(hui) 產(chan) 生一些修飾後的蛋白質產(chan) 物,它們(men) 在電泳中會(hui) 形成額外的條帶,影響對正常條帶的判斷。



米兰俱乐部足球推荐计划
地址:上海市奉賢區金大公路8218號1幢
郵箱:1006909781@qq.com
傳真:QQ1006909781
關注我們
歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關注我們的微信公眾號
了解更多信息