
密度梯度離心原理:血液中各類細胞的密度存在差異 ,紅細胞和多核白細胞比重較大,約為(wei) 1.092,而淋巴細胞和單個(ge) 核細胞比重相對較小,在 1.075 左右。FICOLL PAQUE PLUS 的密度精準控製在 1.077±0.001 g/mL,這一密度恰好介於(yu) 紅細胞和淋巴細胞之間。當含有多種細胞的血液樣本與(yu) FICOLL PAQUE PLUS 混合後進行離心時,不同細胞會(hui) 依據自身密度在離心力的作用下,在分離液中形成不同的層次,從(cong) 而實現細胞的分離。
成分協同作用:其主要成分包括 9.0% (w/v) 的泛影葡胺鈉、5.7% (w/v) 的 Ficoll PM400 以及 0.0231%(w/v) 的依地酸鈣鈉 。泛影葡胺鈉可增加溶液的密度,有助於(yu) 形成穩定的密度梯度;Ficoll PM400 作為(wei) 一種高分子量蔗糖聚合物,能促進紅細胞的凝集,使得紅細胞在離心過程中更容易沉澱,從(cong) 而與(yu) 淋巴細胞更好地分離;依地酸鈣鈉則起到抗凝作用,防止血液樣本在分離過程中發生凝固,保證細胞的完整性和活性。
高純度與(yu) 高回收率:使用 FICOLL PAQUE PLUS 分離淋巴細胞,所得單核細胞含量可達 95 ±5% ,淋巴細胞得率為(wei) 60 ± 20%。這意味著科研人員能夠從(cong) 外周血樣本中獲取到高純度的淋巴細胞,且細胞的回收率較高,為(wei) 後續實驗提供了充足且優(you) 質的細胞材料。無論是進行淋巴細胞功能研究,還是基於(yu) 淋巴細胞的細胞治療探索等,高純度和高回收率的淋巴細胞樣本都至關(guan) 重要,能有效減少雜質細胞對實驗結果的幹擾,提高實驗的準確性和可靠性。
良好的細胞活力維持:該產(chan) 品在分離過程中能很好地維持淋巴細胞的活力 ,細胞存活率可達 95 ±5%。這得益於(yu) 其溫和的分離條件以及對細胞無明顯毒性的成分。高活力的淋巴細胞對於(yu) 需要細胞繼續進行培養(yang) 、增殖或功能檢測的實驗尤為(wei) 關(guan) 鍵,如淋巴細胞的體(ti) 外刺激實驗、細胞因子分泌檢測等,隻有保持細胞的高活力,才能真實反映淋巴細胞在生理狀態下的功能和特性。
低內(nei) 毒素水平:FICOLL PAQUE PLUS 的內(nei) 毒素水平極低,小於(yu) 0.12 EU/mL 。內(nei) 毒素的存在可能會(hui) 對細胞產(chan) 生毒性作用,影響細胞的正常生理功能,進而幹擾實驗結果。低內(nei) 毒素水平保證了分離得到的淋巴細胞不受內(nei) 毒素的汙染和幹擾,對於(yu) 一些對內(nei) 毒素敏感的實驗,如細胞培養(yang) 、免疫細胞功能研究等,能夠提供更純淨、可靠的細胞樣本,確保實驗結果的準確性和可重複性。
操作簡便快速:基於(yu) Boyum 發展的方法,使用 FICOLL PAQUE PLUS 進行淋巴細胞分離僅(jin) 需簡單快速的離心操作 。科研人員隻需將適量的血液樣本小心鋪加在 FICOLL PAQUE PLUS 分離液上方,然後放入離心機中,按照推薦的離心條件進行離心,即可實現細胞的分層分離。整個(ge) 操作過程無需複雜的設備和繁瑣的步驟,即使是實驗新手也能快速上手,大大提高了實驗效率,節省了科研時間。
免疫學研究:在免疫學研究中,淋巴細胞是核心研究對象 。FICOLL PAQUE PLUS 分離得到的高純度、高活力淋巴細胞,可用於(yu) 研究淋巴細胞的免疫應答機製,如 T 細胞和 B 細胞的活化、增殖、分化過程,以及它們(men) 在免疫防禦、免疫調節中的作用。通過對淋巴細胞的深入研究,有助於(yu) 揭示免疫係統的工作原理,為(wei) 開發新型免疫治療方法、疫苗等提供理論基礎。例如,在腫瘤免疫治療研究中,分離出的淋巴細胞可用於(yu) 體(ti) 外擴增和修飾,使其具備更強的抗腫瘤活性,再回輸到患者體(ti) 內(nei) ,以達到治療腫瘤的目的。
傳(chuan) 染病研究:在傳(chuan) 染病研究領域,淋巴細胞在機體(ti) 對抗病原體(ti) 感染的過程中發揮著重要作用 。利用 FICOLL PAQUE PLUS 分離患者外周血中的淋巴細胞,可用於(yu) 研究淋巴細胞對病原體(ti) 的免疫反應,包括淋巴細胞分泌細胞因子的類型和水平、淋巴細胞對病原體(ti) 的殺傷(shang) 能力等。這有助於(yu) 深入了解傳(chuan) 染病的發病機製,為(wei) 開發針對性的治療藥物和疫苗提供關(guan) 鍵線索。例如,在艾滋病研究中,通過對 HIV 感染者淋巴細胞的研究,可探索 HIV 病毒如何感染淋巴細胞以及淋巴細胞如何抵抗病毒感染,為(wei) 尋找有效的艾滋病治療方法提供方向。
血液學研究:在血液學研究中,淋巴細胞的數量和功能變化與(yu) 多種血液疾病密切相關(guan) 。FICOLL PAQUE PLUS 可用於(yu) 從(cong) 患者血液樣本中分離淋巴細胞,用於(yu) 分析淋巴細胞在白血病、淋巴瘤等血液腫瘤中的異常表現,如細胞形態、免疫表型、基因表達等方麵的變化。通過對這些異常的研究,有助於(yu) 血液疾病的診斷、分型和預後評估,同時也為(wei) 開發新的治療策略提供依據。例如,在白血病的診斷和治療監測中,準確分離和分析淋巴細胞的變化,對於(yu) 判斷病情進展和治療效果具有重要意義(yi) 。
樣本準備:使用 FICOLL PAQUE PLUS 時,建議使用新鮮采集的人外周血樣本 。采血過程應嚴(yan) 格遵循無菌操作原則,使用無熱原、無內(nei) 毒素的采血器材。采集後的血液樣本若不能立即進行分離,可在室溫下短暫保存,但不宜超過數小時,以免影響細胞活性和分離效果。若需長時間保存,可采用適當的抗凝劑處理後,在低溫下保存,但應注意保存條件對細胞的影響。
實驗操作流程:操作時,先將 FICOLL PAQUE PLUS 分離液小心轉移至離心管中,注意不要產(chan) 生氣泡 。然後用移液器將稀釋後的血液樣本緩慢鋪加在分離液上方,形成清晰的界麵。血液與(yu) 分離液的體(ti) 積比推薦為(wei) 2:3 。將離心管放入離心機中,按照推薦的離心條件(如室溫下,以特定轉速離心一定時間,具體(ti) 參數可參考產(chan) 品說明書(shu) )進行離心。離心結束後,可觀察到明顯的細胞分層,位於(yu) 分離液界麵上的白膜層即為(wei) 富含淋巴細胞的單個(ge) 核細胞層。使用移液器小心吸取該層細胞,轉移至新的離心管中,再通過適當的洗滌步驟去除殘留的分離液和雜質,即可獲得相對純淨的淋巴細胞。
存儲(chu) 條件:為(wei) 保證 FICOLL PAQUE PLUS 的性能,應將其存儲(chu) 於(yu) 4 - 30℃的環境中 。避免陽光直射和高溫環境,防止產(chan) 品變質。在使用過程中,要注意產(chan) 品的有效期,盡量在有效期內(nei) 使用,以確保實驗結果的可靠性。開封後的產(chan) 品應盡快使用,並妥善保存剩餘(yu) 部分,防止微生物汙染。若發現產(chan) 品出現渾濁、沉澱或顏色異常等情況,請勿使用。