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UElandy PCR 清潔試劑盒：分子生物學研究的得力助手

更新時間：2025-06-19 點擊次數：356

在分子生物學研究領域，PCR 技術作為核心工具，廣泛應用於基因擴增、疾病診斷、法醫鑒定等諸多方麵。然而，PCR 反應結束後，產物中往往混雜著未反應的引物、dNTPs、酶以及鹽離子等雜質，這些雜質會嚴重幹擾後續實驗的準確性與可靠性，如在測序、克隆、酶切等實驗中，可能導致結果偏差甚至實驗失敗。因此，高效、精準地純化 PCR 產物成為分子生物學實驗流程中至關重要的環節。UElandy PCR 清潔試劑盒應運而生，憑借其的性能，為科研工作者提供了便捷、可靠的 PCR 產物純化解決方案。

一、技術原理

UElandy PCR 清潔試劑盒主要基於矽膠膜吸附技術。在 PCR 反應液中加入特定的結合緩衝液（Buffer PCR - A），其中含有的離液鹽成分可破壞核酸分子的水化層，使 DNA 雙鏈解旋並處於單鏈狀態，同時降低溶液中各種分子的表麵張力，促使 DNA 與矽膠膜發生特異性吸附。在合適的條件下，PCR 產物中的 DNA 片段能夠牢固地結合到矽膠膜上，而引物、dNTPs、酶以及鹽離子等雜質則隨廢液被去除。經過多次洗滌步驟，使用洗滌緩衝液（Buffer W2）進一步清除殘留雜質，最後通過低離子強度的洗脫緩衝液（Eluent）或無菌水，改變 DNA 與矽膠膜之間的相互作用力，使純化後的 DNA 從矽膠膜上洗脫下來，從而獲得高純度的 PCR 產物。

二、產品組成與特點

（一）產品組成

Buffer PCR - A：DNA 結合溶液，其配方能夠有效促使 PCR 產(chan) 物中的 DNA 與(yu) 矽膠膜結合，確保高效捕獲目標 DNA 片段。

Buffer W2 concentrate：去鹽液，使用前需按試劑瓶上指定體(ti) 積加入無水乙醇（可用無水乙醇或 95% 乙醇）進行稀釋。稀釋後的 Buffer W2 可有效去除結合在矽膠膜上的鹽分及其他小分子雜質，保證 DNA 的純度。

Eluent：洗脫液，成分為(wei) 2.5 mM Tris - HCl，pH 8.5。該洗脫液能夠在不影響 DNA 穩定性的前提下，溫和地將 DNA 從(cong) 矽膠膜上洗脫下來，為(wei) 後續實驗提供純淨的 DNA 樣本。

（二）產品特點

高純度純化：通過優(you) 化的矽膠膜吸附與(yu) 洗滌流程，UElandy PCR 清潔試劑盒能夠高效去除 PCR 產(chan) 物中的引物、dNTPs、酶以及鹽離子等雜質，使純化後的 DNA A260/A280 比值通常處於(yu) 1.7 - 1.9 之間，滿足各種對 DNA 純度要求的下遊實驗需求，如高精度測序、複雜的克隆實驗等。

高回收率：對於(yu) 不同長度的 PCR 片段（涵蓋 50 bp - 20 kb 的廣泛範圍），該試劑盒均能實現高回收率，一般可達 70% - 95%。即使對於(yu) 短至 50 bp 的小片段 DNA，也能保證較高的回收效率，減少珍貴樣本的損失，確保實驗數據的完整性和可靠性。

操作便捷：試劑盒提供了負壓法和離心法兩(liang) 種操作方式，用戶可根據自身實驗設備與(yu) 操作習(xi) 慣靈活選擇。無論是在配備負壓裝置的高通量實驗室，還是主要依靠離心機的常規實驗室，都能輕鬆完成 PCR 產(chan) 物的純化工作。整個(ge) 操作流程簡單明了，無需複雜的技術培訓，即可快速上手，顯著提高實驗效率。

兼容性強：適用於(yu) 多種 PCR 反應體(ti) 係及不同來源的 PCR 產(chan) 物，無論是常規 PCR、巢式 PCR，還是實時熒光定量 PCR 產(chan) 生的產(chan) 物，都能進行有效的純化。同時，該試劑盒與(yu) 後續多種分子生物學實驗技術高度兼容，純化後的 DNA 可直接用於(yu) 限製性酶切、連接反應、分子雜交以及自動化熒光測序等實驗，為(wei) 科研工作者構建了順暢的實驗流程。

高通量處理：采用 96 孔板形式的 DNA 製備板，特別適合高通量實驗需求。在大規模的基因篩查、臨(lin) 床樣本檢測等實驗中，能夠同時處理大量樣本，大大縮短實驗時間，提高實驗通量，降低實驗成本。

三、操作流程

（一）負壓法操作步驟

準備工作：正確連接負壓裝置，將 96 孔 DNA 製備板置於(yu) 負壓裝置上。同時，確保 Buffer W2 concentrate 已按要求加入無水乙醇並混合均勻。

結合反應：在 PCR、酶切、酶標或測序反應液中，加入 3 倍體(ti) 積的 Buffer PCR - A（若 Buffer PCR - A 不足 100 μl，則需加至 100 μl）。充分混合均勻後，將混合液轉移到 96 孔 DNA 製備板中。開啟負壓裝置，並調節負壓至 - 25 - 30 英寸汞柱，緩慢吸掉板中的溶液，使 DNA 牢固結合在矽膠膜上。

洗滌步驟：向 96 孔 DNA 製備板中加入 0.3 ml Buffer W2，再次開啟負壓吸盡管中溶液。重複此洗滌步驟兩(liang) 次，以去除雜質。

幹燥處理：保持負壓狀態，將 96 孔 DNA 製備板抽吸 10 min，盡量去除殘留液體(ti) 。然後，將導流管朝下，將 96 孔 DNA 製備板在長纖維性紙巾上用力拍擊 6 次，進一步去除可能殘留的液體(ti) 。

洗脫 DNA：將 96 孔 DNA 製備板置於(yu) 96 孔 V 型底板上，在膜正中央加入 25 - 30 μl 水或 Eluent，室溫靜置 1 min，使洗脫液充分浸潤矽膠膜。隨後，以 3000 x g 離心 5 min，將純化後的 DNA 洗脫到 V 型底板中。

（二）離心法操作步驟

結合反應：在 PCR、酶切、酶標或測序反應液中，加入 3 倍體(ti) 積的 Buffer PCR - A（若 Buffer PCR - A 不足 100 μl，則需加至 100 μl），充分混勻。將混合液轉移到 96 孔 DNA 製備板中，然後將 96 孔 DNA 製備板置於(yu) 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 1000 x g 離心 1 min，棄去濾液，使 DNA 結合在矽膠膜上。

洗滌步驟：向 96 孔 DNA 製備板中加入 0.3 ml Buffer W2，以 1000 x g 離心 1 min，棄去濾液。重複此洗滌步驟一次，確保雜質被充分去除。

幹燥處理：將 96 孔 DNA 製備板再次置於(yu) 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 3000 x g 離心 10 min，盡可能去除殘留液體(ti) 。

洗脫 DNA：將 96 孔 DNA 製備板置於(yu) 潔淨的 96 孔 V 型底板中，在膜正中央加入 25 - 30 μl 水或 Eluent，室溫靜置 1 min。最後，以 3000 x g 離心 5 min，將純化後的 DNA 洗脫到 V 型底板中。

注意事項：在操作過程中，應嚴格按照試劑盒說明書進行試劑的添加與操作條件的控製。例如，Buffer W2 concentrate 在使用前必須準確加入無水乙醇；洗脫時，若將洗脫液或水加熱至 65℃，有利於提高洗脫效率；由於 DNA 分子呈酸性，建議將純化後的 DNA 保存在 2.5 mM Tris - HCl，pH 8.5 的洗脫液中，以維持 DNA 的穩定性。

四、應用案例

（一）基因測序

在二代基因測序實驗中，PCR 擴增是獲取足夠量目標 DNA 片段的常用手段。然而，擴增產物中的雜質會嚴重影響測序的準確性和讀長。使用 UElandy PCR 清潔試劑盒對 PCR 產物進行純化後，可有效去除引物二聚體、未反應的 dNTPs 等雜質，為測序反應提供高純度的 DNA 模板。經實際應用驗證，使用該試劑盒純化後的 PCR 產物進行測序，測序峰圖清晰，背景噪音低，讀長顯著提高，能夠準確解讀基因序列信息，為基因功能研究、遺傳疾病診斷等提供可靠的數據支持。

（二）分子克隆

在構建重組質粒的分子克隆實驗中，需要將 PCR 擴增得到的目的基因片段與載體進行連接。PCR 產物中的雜質可能會幹擾連接反應的效率，導致重組質粒構建失敗。利用 UElandy PCR 清潔試劑盒對 PCR 產物進行純化，可確保目的基因片段的高純度。純化後的基因片段與載體連接效率大幅提升，轉化大腸杆菌後，陽性克隆率顯著增加。通過對陽性克隆的篩選與鑒定，成功構建了多種重組質粒，為後續基因表達、蛋白質功能研究等實驗奠定了堅實基礎。

（三）SNP 分析

單核苷酸多態性（SNP）分析在遺傳學研究、藥物基因組學等領域具有重要意義。在基於 PCR 技術的 SNP 分析實驗中，PCR 產物的純度直接影響 SNP 位點的準確識別。UElandy PCR 清潔試劑盒能夠高效去除 PCR 產物中的雜質，保證 SNP 分析結果的可靠性。在對大量樣本進行 SNP 分析時，該試劑盒的高通量處理能力得以充分發揮，可同時對 96 個樣本進行 PCR 產物純化，大大提高了分析效率，為大規模遺傳關聯研究提供了有力工具。

五、市場競爭優勢

在 PCR 清潔試劑盒市場中，競爭激烈，眾多品牌紛紛推出各自的產品。然而，UElandy PCR 清潔試劑盒憑借其優勢脫穎而出。與部分競爭對手產品相比，UElandy 試劑盒在純度和回收率方麵表現更為出色。一些同類產品在去除雜質時可能會導致 DNA 的部分損失，使得回收率較低，且難以有效去除引物二聚體等頑固雜質，影響後續實驗。而 UElandy PCR 清潔試劑盒通過優化的矽膠膜吸附與洗滌體係，在保證高回收率的同時，實現了更高水平的雜質去除，為用戶提供了質量更優的純化 DNA 樣本。

在操作便捷性上，UElandy 提供的負壓法和離心法兩種操作方式，相比某些僅支持單一操作方式的試劑盒，更能滿足不同實驗室的設備條件和用戶操作習慣。對於高通量需求的用戶，其 96 孔板設計以及高效的操作流程，能夠顯著提高實驗通量，降低時間成本。此外，UElandy 作為品牌，背後有專業的研發與技術支持團隊，能夠及時響應用戶在使用過程中遇到的問題，為用戶提供的技術指導與售後服務，這也是其在市場競爭中的一大優勢。

UElandy PCR 清潔試劑盒以其先進的技術原理、的產品性能、便捷的操作流程以及廣泛的應用範圍，成為分子生物學研究中的重要工具。無論是在科研院校的基礎研究，還是在生物技術企業的產品研發、臨床診斷機構的樣本檢測等領域，都能為用戶提供高效、可靠的 PCR 產物純化解決方案，助力科研工作者突破實驗瓶頸，推動生命科學研究不斷向前發展。

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