細胞培養長期研究中，TrypLE Express酶的使用注意事項有哪些？

貼壁細胞係：像中國倉(cang) 鼠卵巢細胞（CHO）、人胚腎 293 細胞（HEK 293）這類常見的貼壁細胞係，通常貼壁較為(wei) 緊密。TrypLE Express 酶能夠特異性地裂解賴氨酸和精氨酸 C - 末端的肽鍵，有效解離細胞與(yu) 培養(yang) 皿表麵的連接。在長期培養(yang) 中，該酶溫和的作用特性不會(hui) 對細胞表麵標誌物造成明顯破壞，例如多次傳(chuan) 代後，HEK 293 細胞表麵的相關(guan) 抗原標誌物表達依然穩定，細胞形態和生長速率也能保持相對穩定，保證了實驗的連續性和結果的可靠性。不過，由於(yu) 不同貼壁細胞係貼壁強度存在差異，在使用 TrypLE Express 酶時，需要針對具體(ti) 細胞係摸索合適的作用時間和濃度，以達到最佳解離效果 。

懸浮細胞係：對於(yu) 懸浮生長的細胞係，如 Jurkat 細胞，雖然不存在貼壁解離的問題，但在細胞傳(chuan) 代、分選等操作中也會(hui) 用到 TrypLE Express 酶。研究表明，相較於(yu) 傳(chuan) 統胰蛋白酶，TrypLE Express 酶處理 Jurkat 細胞後，細胞表麵 CD2 等標誌物無明顯損失，細胞活力和功能得以較好維持。在長期培養(yang) 過程中，能夠減少對細胞生長和代謝的影響，使細胞保持良好的增殖狀態，為(wei) 後續的細胞功能研究、藥物篩選等實驗提供穩定的細胞來源 。

原代人角質化細胞：原代細胞對外部環境變化較為(wei) 敏感，TrypLE Express 酶非動物源性的特點為(wei) 其提供了更安全的解離環境，避免了傳(chuan) 統動物源性酶可能引入的病原體(ti) 風險。在原代人角質化細胞的長期培養(yang) 中，使用該酶能夠在保證細胞解離效果的同時，減少對細胞的損傷(shang) ，維持細胞的正常生理功能。細胞可以保持良好的分化特性，細胞間的連接結構和細胞表麵的特異性蛋白表達相對穩定，有助於(yu) 深入研究角質化細胞的生物學特性和相關(guan) 疾病機製 。

原代神經元細胞：神經元細胞較為(wei) 脆弱，對酶的作用更為(wei) 敏感。TrypLE Express 酶成分均一、純度高的特性，使其在解離原代神經元細胞時，能將對細胞的損害降到。在長期培養(yang) 中，可較好地保留神經元細胞的突觸結構和電生理特性，細胞的存活時間和功能維持時間顯著延長，為(wei) 神經係統疾病研究、神經再生研究等提供了更優(you) 質的細胞模型 。

胚胎幹細胞：胚胎幹細胞具有自我更新和多向分化潛能，在其長期培養(yang) 過程中，對細胞狀態的維持要求。TrypLE Express 酶溫和的作用方式不會(hui) 影響胚胎幹細胞的這些特性，多次傳(chuan) 代後，細胞依然能夠保持較高的幹性，細胞表麵的幹性標誌物如 Oct4、Sox2 等表達穩定。這使得科研人員能夠利用該酶進行胚胎幹細胞的傳(chuan) 代、擴增和誘導分化等操作，為(wei) 幹細胞治療、發育生物學研究等領域提供可靠的細胞資源 。

誘導多能幹細胞（iPSCs）：iPSCs 同樣需要在培養(yang) 過程中維持良好的細胞狀態。TrypLE Express 酶在 iPSCs 的長期培養(yang) 中，既能實現高效的細胞解離，又不會(hui) 對細胞的重編程狀態和分化能力產(chan) 生明顯影響。細胞可以穩定地進行傳(chuan) 代，且在誘導分化為(wei) 不同細胞類型時，能夠保持正常的分化潛能和效率，有助於(yu) 推動 iPSCs 在疾病建模、藥物研發等方麵的應用 。