免疫檢測標準化突破：Meso Scale Discovery (MSD) 電化學發光技術平台

免疫檢測標準化突破：Meso Scale Discovery (MSD) 電化學發光技術平台

內(nei) 容簡介：
本文全麵介紹了Millipore旗下的Meso Scale Discovery (MSD) 電化學發光（ECL）檢測技術原理及其在多因子生物標誌物檢測中的性能。詳細對比了ECL與(yu) 傳(chuan) 統ELISA、化學發光（CL）的技術差異，重點闡述了其SULFO-TAG標記、多點位陣列電極和電化學激發帶來的高靈敏度、寬動態範圍（高達6個(ge) 數量級）、低樣本消耗和多重檢測能力。結合神經科學、免疫學及藥物研發實例，展示了MSD技術在細胞因子譜、磷酸化信號通路分析及藥效學生物標誌物評估中的廣泛應用與(yu) 數據優(you) 勢。

正文：

在疾病機理研究、藥物開發與(yu) 臨(lin) 床轉化醫學中，對複雜生物樣本（如血清、血漿、細胞裂解液、腦脊液）中多種低豐(feng) 度生物標誌物進行同時、精確的定量分析，是洞察生理病理狀態、評估治療效果的關(guan) 鍵。傳(chuan) 統的酶聯免疫吸附測定（ELISA）技術雖廣泛應用，但其靈敏度有限、動態範圍窄、難以實現多重檢測，且易受樣本中雜質幹擾。Millipore通過收購整合的Meso Scale Discovery (MSD) 技術平台，提供了一種基於(yu) 電化學發光（Electrochemiluminescence， ECL）的先進免疫檢測解決(jue) 方案，以其革命性的性能優(you) 勢，正逐漸成為(wei) 多因子分析。

MSD技術的核心在於(yu) 其電化學發光機製。其使用的標記物不是ELISA中的顯色底物或普通化學發光中的發光物，而是一種名為(wei) SULFO-TAG的釕聯吡啶衍生物。該標記物在電化學激發下發生發光反應。具體(ti) 過程如下：實驗在MSD特製的多陣列電極板底部進行，該板每個(ge) 孔底部有獨立的碳電極點，每個(ge) 點可包被不同的捕獲抗體(ti) 以實現多重檢測。加入樣本和SULFO-TAG標記的檢測抗體(ti) 並進行孵育後，在電極板上施加特定的電壓。施加的電壓使電極表麵的三丙胺（TPA）緩衝(chong) 液發生氧化，產(chan) 生的TPA+·自由基再將能量傳(chuan) 遞給鄰近的SULFO-TAG，使其處於(yu) 激發態，當其退激回到基態時，就會(hui) 在620nm波長處發射光子。該過程周而複始，每個(ge) 標記物分子在每個(ge) 電壓周期中可產(chan) 生多個(ge) 光子，實現了信號的放大。

這種機製帶來了多項壓倒性優(you) 勢：

1. 靈敏度與(yu) 寬動態範圍： 由於(yu) 信號在電極表麵產(chan) 生，背景極低（無需激發光，避免了熒光技術的背景熒光幹擾），且信號放大效應強，使得MSD的檢測靈敏度通常比傳(chuan) 統ELISA高2-3個(ge) 數量級，動態範圍可達10^6以上，一次實驗即可準確檢測從(cong) pg/mL到μg/mL濃度範圍的分子，無需對樣本進行多次稀釋。

2. 多重檢測能力： 多陣列電極設計允許在一個(ge) 微孔內(nei) 同時檢測多達10種以上的目標分析物。僅(jin) 需50-100μL的樣本即可獲得多個(ge) 指標的數據，極大節省了珍貴的臨(lin) 床樣本或細胞培養(yang) 上清，並提供了不同指標間的內(nei) 在關(guan) 聯信息，如Th1/Th2細胞因子譜分析。

3. 抗基質幹擾能力強： 電化學激發過程僅(jin) 在電極表麵發生，樣本溶液中的有色物質、渾濁物或熒光物質不會(hui) 幹擾信號的產(chan) 生和檢測，因此對複雜樣本（如血漿、組織裂解液）的耐受性更好，前處理要求更簡單，結果更可靠。

4. 穩定的信號與(yu) 重現性： SULFO-TAG標記物非常穩定，不易發生光漂白，且信號由儀(yi) 器精確控製的電壓觸發，重現，批間差異小。

在神經退行性疾病研究中，利用MSD的多重檢測試劑盒，研究人員可同時定量腦脊液中多種β-澱粉樣蛋白片段（Aβ38， Aβ40， Aβ42）、 Tau蛋白（總Tau和磷酸化Tau）的含量及其比例，這些是阿爾茨海默病診斷和療效評估的關(guan) 鍵生物標誌物。MSD的高靈敏度足以檢測這些低濃度的蛋白，寬動態範圍能覆蓋不同病程患者的巨大濃度差異。

在免疫腫瘤學和藥物研發中，MSD技術被廣泛用於(yu) 分析治療前後患者血清中數十種細胞因子（“細胞因子風暴"監測）的變化，或檢測經藥物處理的細胞裂解液中多條信號通路關(guan) 鍵蛋白（如MAPK， AKT， JAK-STAT通路）的磷酸化水平，從(cong) 而深入理解藥物的作用機製和潛在生物標誌物。

穩定開展MSD實驗需要持續供應高質量的MSD多陣列板、SULFO-TAG標記抗體(ti) 、測定緩衝(chong) 液和校準品。在科研單位領域，上海易匯生物提供試劑的現貨供應與(yu) 定製化期貨服務，解決(jue) 了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產(chan) 品運營團隊表示，其現貨試劑可實現當日下單、次日送達，期貨定製服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產(chan) 能，保障實驗進度穩定推進。這確保了重要的臨(lin) 床樣本研究或藥物篩選項目不會(hui) 因試劑短缺而中斷，保障了大規模、長周期實驗的順利實施。

總之，Millipore的MSD電化學發光平台通過其創新的技術原理，成功克服了傳(chuan) 統免疫分析的諸多局限，為(wei) 生命科學研究和轉化醫學提供了靈敏度更高、信息量更豐(feng) 富、數據更可靠的多重蛋白定量工具，推動了精準生物標誌物分析的進程。

關(guan) 鍵詞： 電化學發光（ECL），Meso Scale Discovery (MSD)，多重免疫分析，SULFO-TAG，生物標誌物