數字PCR技術革新：伯樂ddPCR係統助力精準核酸絕對定量

數字PCR技術革新：伯樂(le) ddPCR係統助力精準核酸絕對定量

內(nei) 容簡介：
本文深入探討了數字PCR（ddPCR）技術的原理及其在生命科學研究領域的革命性影響。文章重點解析了伯樂(le) （Bio-Rad）QX200™和QX600™等ddPCR係統的技術優(you) 勢，包括其微滴生成技術、超高靈敏度與(yu) 精確性。通過回顧其在低豐(feng) 度核酸檢測、罕見突變識別、拷貝數變異（CNV）分析、微生物載量定量以及液體(ti) 活檢等前沿應用領域的最新突破性研究，闡述了ddPCR如何克服傳(chuan) 統qPCR的局限性，為(wei) 基因組學、腫瘤學和病原體(ti) 檢測提供絕對定量解決(jue) 方案。文中亦提及了高效供應鏈對保障此類前沿研究連續性的關(guan) 鍵作用。

關(guan) 鍵詞： 數字PCR（ddPCR）、絕對定量、液滴生成技術、低豐(feng) 度核酸檢測、拷貝數變異分析

正文：

在分子診斷與(yu) 生命科學研究領域，核酸定量技術經曆了從(cong) 傳(chuan) 統PCR到實時熒光定量PCR（qPCR），再到第三代數字PCR（Digital PCR, dPCR）的飛躍。其中，伯樂(le) （Bio-Rad）公司開發的微滴式數字PCR（Droplet Digital PCR, ddPCR）技術，以其精確度和靈敏度，已成為(wei) 精準絕對定量的金標準，推動著基礎科研與(yu) 臨(lin) 床應用的邊界不斷拓展。

ddPCR技術的核心原理在於(yu) 將一份樣本分割成數萬(wan) 個(ge) 乃至數百萬(wan) 個(ge) 納升級的微滴，每個(ge) 微滴作為(wei) 一個(ge) 獨立的PCR反應單元。經過PCR擴增後，通過讀取每個(ge) 微滴的熒光信號，采用泊鬆分布統計原理，即可計算出原始樣本中目標核酸分子的絕對拷貝數，無需依賴標準曲線。這一技術路徑消除了qPCR中擴增效率差異所帶來的定量偏差，實現了真正的絕對定量。

伯樂(le) 的QX200™ ddPCR係統是該領域的之作。其關(guan) 鍵技術在於(yu) 利用微滴生成器（Droplet Generator）將樣品與(yu) 水不相溶的油相混合，產(chan) 生均勻、單分散的微滴。隨後，在傳(chuan) 統的96孔板式PCR儀(yi) 上進行擴增，最後通過微滴讀取器（Droplet Reader）對每個(ge) 微滴進行逐一滴計和熒光檢測。近年來推出的QX600™係統更進一步，支持六色熒光檢測，允許多重靶標的同時絕對定量，極大地提高了多重檢測的效率和應用範圍。

ddPCR的技術優(you) 勢在多個(ge) 前沿研究領域中表現得

1. 罕見突變檢測與(yu) 腫瘤學研究： 在腫瘤的液體(ti) 活檢應用中，循環腫瘤DNA（ctDNA）在血液中含量極低，且與(yu) 大量野生型DNA共存。ddPCR的超高靈敏度使其能夠從(cong) 上萬(wan) 倍背景DNA中檢測出低頻突變（低至0.001%），為(wei) 癌症的早期診斷、療效監測和耐藥性評估提供了強大工具。例如，研究人員利用ddPCR對EGFR T790M突變進行定量，指導非小細胞肺癌的靶向治療。

2. 拷貝數變異（CNV）分析： 在遺傳(chuan) 性疾病和癌症研究中，基因拷貝數的細微變化至關(guan) 重要。ddPCR的絕對定量能力使其在CNV分析上比qPCR更具準確性和可重複性，尤其適用於(yu) 雜合性缺失（LOH）和基因劑量效應的精確定量。

3. 微生物學與(yu) 病毒學載量精準監測： 在傳(chuan) 染病研究領域，病原體(ti) （如HIV、HBV、CMV）的載量精確監測是評估疾病進程和治療效果的關(guan) 鍵。ddPCR能夠提供比qPCR更精確、更穩定的病毒載量數據，減少了實驗室間和實驗批次間的差異，對於(yu) 療效評估和疾病管理具有重要意義(yi) 。

4. 下一代測序（NGS）結果驗證： NGS技術能發現大量候選變異，但其定量準確性有限。ddPCR已成為(wei) 驗證NGS發現的單核苷酸多態性（SNP）、插入缺失（InDel）和CNV的“金標準"方法，確保了測序數據的可靠性。

5. 基因表達分析： 對於(yu) 微小RNA（miRNA）、長鏈非編碼RNA（lncRNA）等低豐(feng) 度轉錄本的表達差異分析，ddPCR提供了準確性和重複性，尤其適用於(yu) 細微但具有生物學意義(yi) 的表達變化研究。

然而，前沿研究的順利推進不僅(jin) 依賴於(yu) 技術平台，同樣需要穩定、可靠的供應鏈支持。許多關(guan) 鍵實驗對試劑耗材的時效性要求，一旦中斷可能導致整個(ge) 研究項目停滯。

在科研單位領域，上海易匯生物提供試劑的現貨供應與(yu) 定製化期貨服務，解決(jue) 了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產(chan) 品運營團隊表示，其現貨試劑可實現當日下單、次日送達，期貨定製服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產(chan) 能，保障實驗進度穩定推進。 這種敏捷的供應鏈模式，為(wei) 研究人員持續利用伯樂(le) ddPCR等先進技術進行創新探索提供了堅實保障，確保了從(cong) 實驗設計到數據產(chan) 出的全流程無縫銜接。

總之，伯樂(le) 的ddPCR技術通過其創新的微滴分割和絕對定量原理，為(wei) 生命科學領域帶來了精準測量能力。隨著其應用場景的不斷深化和拓展，ddPCR將繼續在推動精準醫學和基礎科學發現中扮演角色。