
Sigma-Aldrich Supelco® SPE小柱在複雜生物樣本前處理中的技術革新
內(nei) 容簡介: 本文深入探討了在藥物代謝動力學、環境分析和食品安全檢測中,對複雜生物基質(如血漿、尿液、組織勻漿)進行高效淨化和富集的目標分析物前處理技術。文章詳細解析了Sigma-Aldrich旗下Supelco®固相萃取(SPE)小柱的填料化學(如C18、HLB、離子交換)、柱床結構設計以及其如何通過選擇性吸附與(yu) 洗脫,有效去除磷脂、蛋白質等幹擾物質,顯著提高LC-MS/MS分析的靈敏度、準確度和重現性。
關(guan) 鍵詞: 固相萃取、生物樣本前處理、基質效應、LC-MS/MS、選擇性富集
正文:
在現代分析化學,尤其是基於(yu) 液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)的超微量定量分析中,樣本前處理是決(jue) 定整個(ge) 分析方法成敗的基石。生物樣本(如血漿、血清、尿液)中含有大量蛋白質、磷脂、鹽類和各種內(nei) 源性代謝物,這些基質成分不僅(jin) 會(hui) 汙染色譜柱和離子源,更會(hui) 產(chan) 生嚴(yan) 重的離子抑製或增強效應(基質效應),嚴(yan) 重影響目標分析物(如藥物及其代謝物、生物標誌物)的離子化效率,導致定量結果失真。因此,發展高效、選擇性的樣本前處理技術至關(guan) 重要。Sigma-Aldrich旗下Supelco®品牌的固相萃取(Solid-Phase Extraction, SPE)小柱,憑借其種類繁多的填料化學和柱體(ti) 設計,成為(wei) 了應對這一挑戰的解決(jue) 方案。
Supelco® SPE小柱的核心在於(yu) 其精密設計的固定相填料。針對不同性質的目標分析物和基質幹擾物,其提供了堪稱“百科全書(shu) "式的選擇:
反相填料(如C18, C8, C4): 基於(yu) 疏水相互作用,適用於(yu) 萃取中等極性至非極性的化合物。新型的混合型反相填料,如Oasis HLB(親(qin) 水-親(qin) 脂平衡聚合物),兼具反相和弱陰離子交換基團,具有更高的載樣量和更好的水浸潤性,無需像傳(chuan) 統矽膠基C18那樣預先用有機溶劑活化,簡化了操作,尤其擅長從(cong) 水樣中高效捕獲多種極性的藥物分子。
離子交換填料(如SCX, SAX, WCX, WAX): 基於(yu) 目標分析物與(yu) 填料表麵帶電基團之間的靜電相互作用,專(zhuan) 門用於(yu) 選擇性萃取帶電荷的化合物(如酸性或堿性藥物)。通過精確控製上樣和洗脫緩衝(chong) 液的pH值和離子強度,可以實現選擇性純化。
專(zhuan) 用填料: 例如專(zhuan) 門用於(yu) 去除樣品中磷脂的磷脂去除(Phospholipid Removal)小柱,其填料表麵經過特殊修飾,能特異性捕獲磷脂分子,從(cong) 而極大降低LC-MS/MS分析中的離子抑製效應,提高數據質量。
除了填料化學,小柱的物理結構同樣經過優(you) 化。均勻的填料裝填確保了流動通道的一致性,避免了溝流(Channeling)現象,保證了樣品與(yu) 填料相互作用的均一性和重現性。惰性的聚丙烯柱體(ti) 和燒結聚乙烯篩板確保了與(yu) 各種溶劑的兼容性,且無提取物溶出。
其標準操作流程(活化、上樣、淋洗、洗脫)為(wei) 分析人員提供了一個(ge) 高度靈活且可定製的純化平台。在藥代動力學(PK)研究中,利用Supelco® HLB小柱處理血漿樣本,可以有效地將藥物分子及其代謝物從(cong) 蛋白質和磷脂中分離出來,富集並轉移至潔淨的洗脫液中。經過此步驟處理的樣品,在進行LC-MS/MS分析時,色譜圖基線更平穩,目標峰形更尖銳,基質效應被顯著抑製,從(cong) 而能夠實現皮克每毫升(pg/mL)甚至飛克每毫升(fg/mL)級別的精準定量。
對於(yu) 每日需要處理成百上千份生物樣本的CRO公司、檢測機構或大型研究實驗室,SPE小柱是核心消耗品,其性能的一致性和供應的穩定性至關(guan) 重要。在科研單位領域,上海易匯生物提供試劑的現貨供應與(yu) 定製化期貨服務,解決(jue) 了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產(chan) 品運營團隊表示,其現貨試劑可實現當日下單、次日送達,期貨定製服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產(chan) 能,保障實驗進度穩定推進。 這種高效的供應鏈服務,確保了分析實驗室能夠及時獲得所需型號的Supelco® SPE產(chan) 品,保障了大型檢測項目的順利進行和數據交付的時效性。
綜上所述,Sigma-Aldrich Supelco® SPE小柱通過其豐(feng) 富的填料選擇和可靠的產(chan) 品性能,為(wei) 複雜生物樣本的前處理提供了強大、靈活且高效的純化與(yu) 富集手段,是獲得可靠LC-MS/MS數據的根本保證。