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Calcein - AM
特性:本身無熒光,進入活細胞後,被細胞內(nei) 的酯酶水解生成有綠色熒光的 Calcein,可對活細胞進行標記,激發波長為(wei) 495nm,發射波長為(wei) 515nm。
優(you) 點:細胞毒性低,能快速進入細胞,染色效果穩定,可用於(yu) 長時間觀察細胞。
應用:常用於(yu) 細胞活性檢測、細胞追蹤以及細胞內(nei) 鈣離子濃度變化的研究等。
碘化丙啶(PI)
特性:一種核酸染料,不能透過活細胞的細胞膜,但可進入死細胞,與(yu) 雙鏈 DNA 結合後,在 488nm 激光激發下發出紅色熒光,發射波長為(wei) 617nm。
優(you) 點:與(yu) DNA 結合特異性高,熒光強度高,可用於(yu) 區分活細胞和死細胞。
應用:常用於(yu) 細胞凋亡、細胞周期分析以及死活細胞鑒別等實驗。常與(yu) 其他活細胞熒光染料如 Calcein - AM 等聯合使用,通過不同顏色熒光區分活細胞和死細胞。
Hoechst 染料(如 Hoechst 33342、Hoechst 33258)
特性:可穿透細胞膜,與(yu) DNA 特異性結合,在紫外光激發下發出藍色熒光。其中,Hoechst 33342 染色效果較好且細胞毒性相對較低,激發波長為(wei) 350nm,發射波長為(wei) 461nm。
優(you) 點:能對活細胞和固定細胞進行染色,可用於(yu) 觀察細胞核形態和細胞周期分布。
應用:常用於(yu) 細胞凋亡檢測、染色體(ti) 分析以及細胞定位研究等。
吖啶橙(AO)
特性:一種堿性熒光染料,可透過細胞膜進入細胞,與(yu) 細胞內(nei) 的 DNA 和 RNA 結合。在不同的酸堿度環境下,AO 與(yu) DNA 和 RNA 結合後發出不同顏色的熒光。在 pH 7.4 的環境中,AO 與(yu) 雙鏈 DNA 結合發出綠色熒光,與(yu) 單鏈 RNA 結合發出紅色熒光,激發波長為(wei) 488nm,發射波長分別為(wei) 530nm(綠色)和 640nm(紅色)。
優(you) 點:能同時對細胞中的 DNA 和 RNA 進行染色,通過觀察不同顏色的熒光,可了解細胞內(nei) 核酸的分布和狀態。
應用:常用於(yu) 細胞凋亡檢測、細胞自噬研究以及區分正常細胞和腫瘤細胞等。在細胞凋亡過程中,細胞核內(nei) 的 DNA 會(hui) 發生斷裂,由雙鏈變為(wei) 單鏈,吖啶橙染色後可觀察到細胞核由綠色熒光變為(wei) 紅色熒光。
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