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營養(yang) 物質：包含氨基酸、維生素、葡萄糖等細胞生長所必需的基礎營養(yang) 成分 。氨基酸是細胞合成蛋白質的原料；維生素參與(yu) 細胞內(nei) 眾(zhong) 多的代謝反應；葡萄糖則為(wei) 細胞提供能量，這些物質共同滿足細胞生長、分裂和代謝的需求。
生長因子：如表皮生長因子（EGF）、成纖維細胞生長因子（FGF）等 。這些生長因子能夠與(yu) 細胞表麵的特異性受體(ti) 結合，激活細胞內(nei) 的信號傳(chuan) 導通路，促進細胞的增殖、分化和存活。例如，EGF 可刺激上皮細胞的生長和分化，在皮膚細胞培養(yang) 等實驗中發揮重要作用。
結合蛋白：像轉鐵蛋白可結合並轉運鐵離子，為(wei) 細胞提供鐵元素，同時防止鐵離子在溶液中產(chan) 生自由基對細胞造成損傷(shang) ；白蛋白能夠結合和運輸脂肪酸、激素等物質，維持細胞外環境的穩定 。
緩衝(chong) 物質與(yu) pH 調節劑：血清中的碳酸氫鹽、蛋白質等成分構成緩衝(chong) 體(ti) 係，可維持細胞培養(yang) 液的 pH 穩定在 7.2 - 7.4 的適宜範圍，為(wei) 細胞創造穩定的酸堿環境 。
高品質來源：血清取自澳大利亞(ya) 特定區域的健康胎牛，該地區具有嚴(yan) 格的動物健康監管體(ti) 係，有效避免了瘋牛病（BSE）、口蹄疫等重大傳(chuan) 染病源的汙染，從(cong) 源頭上保證了血清的安全性和高品質 。
嚴(yan) 格的質量控製：
微生物檢測：每一批次血清均經過嚴(yan) 格的細菌、真菌、支原體(ti) 和病毒檢測 。采用靈敏度高的檢測方法，如培養(yang) 法、PCR 法等，確保血清無微生物汙染，避免微生物對細胞培養(yang) 造成幹擾，甚至導致細胞死亡。
內(nei) 毒素檢測：通過鱟試劑法（LAL 法）精確測定血清中的內(nei) 毒素含量，每批血清內(nei) 毒素水平低於(yu) 0.06 EU/mL，遠低於(yu) 行業(ye) 標準，減少內(nei) 毒素對細胞生長和實驗結果的不良影響 。
細胞培養(yang) 性能測試：使用多種不同類型的細胞係（如 HeLa 細胞、CHO 細胞等）對血清進行培養(yang) 性能測試，評估細胞的生長速率、形態、存活率等指標，確保血清能夠為(wei) 細胞提供良好的生長支持 。
穩定的批次間一致性：Thermo Fisher Scientific 采用標準化的生產(chan) 流程和先進的質量控製體(ti) 係，從(cong) 血清采集、加工處理到最終檢測，每一個(ge) 環節都嚴(yan) 格把控 。通過對關(guan) 鍵指標的嚴(yan) 格監測和調控，保證不同批次的血清在成分和性能上具有高度一致性，科研人員在進行長期實驗或重複性實驗時，無需擔心因血清批次差異導致實驗結果不穩定的問題。
廣泛的適用性：適用於(yu) 多種細胞類型的培養(yang) ，無論是常規的細胞係，還是培養(yang) 難度較高的原代細胞、胚胎幹細胞等，都能提供良好的營養(yang) 支持 。並且可與(yu) 多種基礎培養(yang) 基（如 DMEM、RPMI 1640 等）配合使用，滿足不同科研實驗的需求。
便捷的使用方式：產(chan) 品以 500 mL 瓶裝形式提供，包裝規格符合實驗室常規使用需求。血清經過 γ 射線輻照處理，在不影響血清成分和性能的前提下，有效殺滅潛在的微生物，用戶無需進行額外的滅菌處理，可直接按照實驗需求進行稀釋和使用，操作便捷高效 。
血清檢查：收到血清後，立即檢查包裝是否完好，標簽信息是否清晰準確，包括產(chan) 品名稱、貨號、規格、批號、有效期、儲(chu) 存條件等 。將血清短暫離心（低速，如 1000 - 2000 rpm，離心 3 - 5 分鍾），使附著在瓶蓋上的血清集中於(yu) 瓶底，避免損失。同時，觀察血清外觀，正常情況下應為(wei) 淺黃色或琥珀色、澄清且無沉澱或渾濁現象。若發現血清顏色異常、有明顯沉澱或異味，請勿使用，並及時聯係供應商處理。
培養(yang) 基配製：根據所培養(yang) 細胞的類型和實驗需求，選擇合適的基礎培養(yang) 基 。在無菌環境下（如超淨工作台），按照培養(yang) 基說明書(shu) 的要求，將基礎培養(yang) 基粉末溶解於(yu) 適量的超純水中，充分攪拌至溶解。然後，根據實驗設計，添加相應的添加劑（如穀氨酰胺、丙酮酸鈉等）。最後，按照一定比例（通常為(wei) 5% - 20%，具體(ti) 比例需根據細胞類型和實驗要求確定）加入胎牛血清，用無菌的移液管或注射器將血清緩慢加入培養(yang) 基中，輕輕搖勻，使血清與(yu) 培養(yang) 基充分混合 。配製好的培養(yang) 基應盡快使用，如需保存，可置於(yu) 2 - 8℃冰箱中，但保存時間不宜過長，以免影響培養(yang) 基的營養(yang) 成分和性能。
細胞培養(yang) 耗材準備：準備好無菌的細胞培養(yang) 瓶、培養(yang) 皿、移液管、槍頭、離心管等耗材 。確保所有耗材均經過嚴(yan) 格的滅菌處理，可通過高壓蒸汽滅菌或購買(mai) 預滅菌的一次性耗材。在使用前，檢查耗材的包裝是否完好，避免汙染。
細胞複蘇（若為(wei) 凍存細胞）：從(cong) 液氮罐中取出凍存的細胞，迅速放入 37℃水浴鍋中，輕輕搖晃，使細胞在 1 - 2 分鍾內(nei) 快速解凍 。將解凍後的細胞懸液轉移至無菌離心管中，加入適量的含血清培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，然後以低速離心（如 800 - 1000 rpm，離心 3 - 5 分鍾），棄去上清液，去除凍存保護劑。向離心管中加入適量的新鮮配製的含血清培養(yang) 基，輕輕吹打，使細胞均勻分散，製成細胞懸液。將細胞懸液接種到細胞培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，補充適量的培養(yang) 基，使細胞密度達到合適範圍（根據細胞類型而定），然後將細胞培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿放入細胞培養(yang) 箱中，在適宜的溫度（一般為(wei) 37℃）、濕度（95%）和氣體(ti) 環境（5% CO₂）下培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：當細胞生長達到 80% - 90% 匯合度時，需要進行傳(chuan) 代培養(yang) 。首先，棄去細胞培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基，用無菌的 PBS 緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗細胞 1 - 2 次，去除殘留的培養(yang) 基和代謝產(chan) 物。然後，加入適量的胰蛋白酶 - EDTA 消化液（根據培養(yang) 瓶大小而定），輕輕搖晃培養(yang) 瓶，使消化液均勻覆蓋細胞表麵，在 37℃培養(yang) 箱中孵育 1 - 3 分鍾，觀察細胞形態變化，當細胞變圓、部分細胞開始脫落時，立即加入含血清培養(yang) 基終止消化（血清中的蛋白可中和胰蛋白酶活性） 。用無菌的移液管輕輕吹打細胞，使細胞脫離培養(yang) 瓶壁，形成細胞懸液。將細胞懸液轉移至無菌離心管中，以低速離心（如 800 - 1000 rpm，離心 3 - 5 分鍾），棄去上清液。根據實驗需求，將細胞重新接種到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，補充適量的含血清培養(yang) 基，放入細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
細胞凍存：當細胞生長狀態良好且數量足夠時，可進行細胞凍存，以備後續實驗使用 。首先，將細胞按照上述傳(chuan) 代步驟消化並製成細胞懸液，然後以低速離心（如 800 - 1000 rpm，離心 3 - 5 分鍾），棄去上清液。向細胞沉澱中加入適量的細胞凍存液（通常為(wei) 含 10% DMSO、90% 胎牛血清的培養(yang) 基），輕輕吹打，使細胞均勻分散於(yu) 凍存液中 。將細胞懸液分裝到無菌的凍存管中，每管體(ti) 積一般為(wei) 1 - 2 mL，並做好標記（注明細胞名稱、凍存日期、批號等信息） 。將凍存管放入程序降溫盒中，置於(yu) - 80℃冰箱中過夜，然後轉移至液氮罐中長期保存 。
血清保存：未開封的血清應儲(chu) 存於(yu) - 20℃冰箱中，可保存 5 年 。避免反複凍融，因為(wei) 凍融過程會(hui) 破壞血清中的蛋白結構，影響血清性能。若血清需多次使用，可在開封後將其分裝成小份（根據每次使用量確定分裝體(ti) 積），密封好後放入 - 20℃冰箱冷凍保存，每次使用時取出一份，避免整瓶血清多次凍融 。已開封的血清，若短時間內(nei) 使用（1 - 2 周），可儲(chu) 存於(yu) 2 - 8℃冰箱；若長時間不用，仍需分裝後冷凍保存 。
廢棄物處理：實驗過程中產(chan) 生的廢棄血清、培養(yang) 基以及含有細胞的液體(ti) 等，應按照實驗室生物安全和化學廢棄物處理規定進行分類處理 。對於(yu) 含有生物活性物質的廢棄物，需進行高壓滅菌或化學消毒處理後，再進行丟(diu) 棄，防止汙染環境和傳(chuan) 播生物危害 。
血清儲(chu) 存與(yu) 解凍：
嚴(yan) 格按照規定的溫度儲(chu) 存血清，避免因儲(chu) 存溫度不當導致血清變質。從(cong) - 20℃冰箱中取出血清進行解凍時，應將血清置於(yu) 2 - 8℃冰箱中緩慢解凍，或采用水浴解凍的方式，但水浴溫度不得超過 37℃，且解凍過程中需不斷輕輕搖晃血清瓶，使血清均勻解凍 。避免將血清暴露在高溫環境下快速解凍，以免引起血清中蛋白沉澱和活性降低。
解凍後的血清應盡快使用，若不能立即使用，應儲(chu) 存於(yu) 2 - 8℃冰箱中，並在一周內(nei) 用完。若血清出現渾濁或沉澱，可通過低速離心（如 1000 - 2000 rpm，離心 5 - 10 分鍾）去除沉澱後使用，但需注意沉澱可能會(hui) 影響血清的部分性能 。
細胞培養(yang) 操作：
在細胞培養(yang) 過程中，要嚴(yan) 格遵守無菌操作規範，在超淨工作台中進行所有操作，使用前需對超淨工作台進行紫外消毒和風機預吹處理 。操作時應佩戴口罩、手套，避免交叉汙染。每次使用完移液管、槍頭等耗材後，應及時丟(diu) 棄，不得重複使用。
不同類型的細胞對血清的需求和耐受性不同，在進行新的細胞培養(yang) 實驗前，建議進行預實驗，摸索最佳的血清添加比例和培養(yang) 條件 。同時，注意觀察細胞的生長狀態，如細胞形態、增殖速度、存活率等，根據細胞狀態及時調整培養(yang) 條件。
在更換培養(yang) 基時，盡量減少細胞暴露在空氣中的時間，避免培養(yang) 基幹涸和細胞脫水。更換培養(yang) 基的頻率應根據細胞的生長速度和代謝情況而定，一般為(wei) 1 - 2 天更換一次，以保證細胞能夠獲得充足的營養(yang) 物質和良好的生長環境 。
安全防護：血清中可能含有未知的生物活性物質，雖然經過嚴(yan) 格檢測，但在操作過程中仍需注意個(ge) 人防護 。避免血清接觸皮膚和眼睛，如不慎接觸，應立即用大量清水衝(chong) 洗，並根據情況就醫。實驗結束後，及時清洗實驗器材和操作台，保持實驗室環境整潔安全 。
細胞生長緩慢或不生長：
原因：可能是血清添加比例不合適、血清質量不佳、培養(yang) 基營養(yang) 成分不足、細胞汙染或培養(yang) 條件不適宜等 。
解決(jue) 方法：嚐試調整血清添加比例，增加或減少血清用量，觀察細胞生長情況；檢查血清的批號和質量檢測報告，確認血清是否合格，必要時更換新批次的血清；檢查培養(yang) 基的配製是否正確，是否添加了足夠的營養(yang) 物質；對細胞進行微生物汙染檢測，如支原體(ti) 檢測等，若發現汙染，及時采取措施處理；優(you) 化培養(yang) 條件，如調整溫度、CO₂濃度、濕度等，確保細胞處於(yu) 適宜的生長環境 。
細胞出現大量死亡：
原因：可能是血清中含有毒素或有害物質、細胞受到微生物汙染、消化過度、培養(yang) 環境突然改變等 。
解決(jue) 方法：檢測血清中的內(nei) 毒素含量和其他有害物質，若血清存在問題，更換新的血清；對細胞和培養(yang) 環境進行微生物檢測，找出汙染源並進行處理；優(you) 化細胞消化步驟，控製消化時間和消化液濃度，避免消化過度；在更換培養(yang) 基、轉移細胞等操作時，盡量保持培養(yang) 環境的穩定，減少對細胞的刺激 。
培養(yang) 基出現渾濁：
原因：可能是培養(yang) 基受到微生物汙染、血清中存在雜質或沉澱、細胞代謝產(chan) 物積累過多等 。
解決(jue) 方法：對培養(yang) 基進行微生物培養(yang) 檢測，確定是否汙染，若汙染，丟(diu) 棄汙染的培養(yang) 基，並對培養(yang) 設備和環境進行消毒；將血清進行低速離心，去除沉澱後再使用；增加培養(yang) 基更換頻率，及時清除細胞代謝產(chan) 物，保持培養(yang) 基的清潔 。
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