TrypLE™ Express Enzyme (1X)—高效溫和的細胞消化解決方案

概述（Introduction）

細胞消化（Cell Dissociation）是細胞培養(yang) 中的關(guan) 鍵步驟，尤其在貼壁細胞傳(chuan) 代（Passaging）或細胞收獲（Harvesting）時。傳(chuan) 統的胰蛋白酶（Trypsin）雖然常用，但其動物來源（如豬或牛胰髒提取）可能導致批次間差異，且過度消化可能損傷(shang) 細胞。

Thermo Fisher Scientific 的 TrypLE™ Express Enzyme (1X), Phenol Red-Free 提供了一種更溫和、穩定且無動物來源（Animal-Origin Free）的替代方案。其不含酚紅（Phenol Red-Free）的配方適用於(yu) 熒光顯微術（Fluorescence Microscopy）、流式細胞術（Flow Cytometry）等對染料敏感的實驗。

產品特點（Key Features）

✅ 溫和高效：模擬胰蛋白酶活性，減少細胞應激（Cell Stress），維持高存活率（Viability >90%）。
✅ 無動物成分（Animal-Free）：重組微生物蛋白酶（Recombinant Microbial Protease），避免病毒或朊病毒汙染風險。
✅ 不含酚紅（Phenol Red-Free）：避免幹擾熒光檢測或光學實驗。
✅ 即用型（Ready-to-Use, 1X）：無需稀釋，操作簡便，減少批次差異（Batch-to-Batch Consistency）。
✅ 廣譜適用性：適用於(yu) 多種哺乳動物細胞（如HEK293、CHO、幹細胞等）。

作用機製（Mechanism of Action）

TrypLE™ Express 含重組蛋白酶（Recombinant Protease），可特異性切割細胞表麵黏附蛋白（如Integrins、Cadherins），促使細胞從(cong) 培養(yang) 表麵解離。相較於(yu) 傳(chuan) 統胰蛋白酶：

• 更穩定：重組技術確保酶活性一致。

• 更溫和：減少過度消化導致的細胞損傷(shang) 。

應用場景（Applications）

🔬 常規細胞傳(chuan) 代（Cell Passaging）
🔬 原代細胞（Primary Cells）和幹細胞（Stem Cells）消化
🔬 3D細胞培養(yang) （如類器官Organoids、腫瘤球Spheroids）的解離
🔬 流式細胞術（Flow Cytometry）、qPCR等下遊檢測

實驗方案（Protocol）

貼壁細胞消化步驟（Adherent Cell Dissociation）

1. 去除培養(yang) 基：吸盡培養(yang) 液，用PBS輕柔洗滌1次。

2. 加入TrypLE™ Express：覆蓋細胞層（如1 mL/25 cm²）。

3. 孵育（Incubate）：37°C, 2-5分鍾（顯微鏡下觀察細胞變圓後即可終止）。

4. 終止反應：加入含血清培養(yang) 基或PBS（比例≥1:1）。

5. 離心收集細胞：1000 rpm, 5分鍾，重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基。

優化建議（Tips for Best Results）

⚠️ 敏感細胞：可縮短孵育時間或用PBS稀釋TrypLE™ Express（如1:1）。
⚠️ 避免過度消化：長時間作用可能降低細胞存活率。

與傳統胰蛋白酶對比（Comparison with Trypsin）