細胞電轉染技術突破難轉染細胞基因遞送瓶頸

細胞電轉染技術突破難轉染細胞基因遞送瓶頸

內(nei) 容簡介：
本文重點介紹Bio-Rad Gene Pulser Xcell電轉染係統在難轉染細胞中的應用突破。係統分析方波脈衝(chong) 、指數衰減波等不同波形參數對轉染效率的影響，探討其在原代細胞、幹細胞和懸浮細胞轉染中的優(you) 化策略。

正文：
電轉染技術通過瞬時電脈衝(chong) 在細胞膜上形成可逆孔隙，實現基因物質的高效遞送。Bio-Rad Gene Pulser Xcell係統提供方波和指數衰減波兩(liang) 種脈衝(chong) 模式，可精確控製電壓、脈衝(chong) 時長和脈衝(chong) 次數等參數。

在技術參數優(you) 化方麵，研究發現：對於(yu) 懸浮細胞（如Jurkat），采用指數衰減波（250V，950μF）可獲得>80%轉染效率；對於(yu) 貼壁細胞（如原代神經元），方波脈衝(chong) （100V，30ms）效果更佳；對於(yu) 難轉染的幹細胞，采用多脈衝(chong) 方波（5×20ms，100V）可顯著提高轉染效率同時保持細胞活力。

係統配備的PC控製軟件包含超過100種細胞類型的預設程序，並可記錄用戶自定義(yi) 方案。阻抗檢測功能可實時監測電轉過程，自動調整脈衝(chong) 參數。實驗數據顯示，相比脂質體(ti) 轉染，電轉染的效率提高3-5倍，特別是在原代T細胞轉染中，效率從(cong) 20%提升至90%以上。

在CAR-T細胞治療研究中，采用優(you) 化後的電轉染方案，CAR基因轉染效率達95%，細胞存活率>85%，臨(lin) 床級細胞治療產(chan) 品生產(chan) 要求。

關(guan) 鍵詞： 電轉染、難轉染細胞、脈衝(chong) 優(you) 化、原代細胞、基因遞送