Bio-Rad 1658033 小型垂直電泳轉印係統科研應用指南

——高效、緊湊的蛋白/核酸分離與(yu) 轉印一體(ti) 化解決(jue) 方案

一、係統核心特性與(yu) 創新設計

1.1 模塊化組件設計

電泳槽：

最大支持 10 cm × 10 cm 凝膠（2塊，厚度0.5-1.5 mm）

冷卻芯設計（溫升＜5℃/小時，200V條件下）

轉印模塊：

半幹轉/濕轉雙模式切換

最大轉印效率：＞90%（測試蛋白10-150 kDa）

1.2 關(guan) 鍵性能參數

參數1658033係統常規小型係統

最大電壓500 V300 V

運行時間（SDS-PAGE）35分鍾（200 V）50-60分鍾

轉印麵積20 cm²10-15 cm²

緩衝(chong) 液需求量300 mL（電泳）500 mL

1.3 適用研究場景

推薦應用：

✓ 快速蛋白篩查（如CRISPR編輯驗證）

✓ 低豐(feng) 度核酸檢測（Northern blot）

✓ 教學實驗室高通量操作

二、標準化操作流程

2.1 電泳步驟

複製

1. 凝膠安裝：

- 將預製膠卡入槽體(ti) ，加入1×Running Buffer

- 避免緩衝(chong) 液溢出（液麵超過電極1 cm）

2. 上樣：

- 使用10 μL上樣槍頭（最大上樣量25 μL/孔）

3. 運行：

- 初始電壓80 V（濃縮膠），進入分離膠後調至120-150 V

2.2 半幹轉印方案

步驟條件注意事項

膜/濾紙預處理浸漬轉印緩衝(chong) 液10秒避免氣泡滯留

"三明治"組裝負極→濾紙/膠/膜/濾紙→正極戴手套操作

轉印參數15 V, 30分鍾分子量＞100 kDa需延長至45分鍾

三、性能優(you) 化與(yu) 問題排查

3.1 電泳質量評估

合格標準：

✓ 蛋白Marker條帶清晰（無彌散）

✓ 前沿指示劑（溴酚藍）呈直線遷移

3.2 轉印效率驗證

Ponceau S染色法：

複製

1. 轉印後膜用0.1% Ponceau S染色5分鍾

2. 脫色後觀察：

- 合格：所有目標條帶可見

- 失敗：高分子量蛋白缺失（需延長轉印時間）

3.3 常見問題診斷

現象可能原因解決(jue) 方案

條帶彎曲緩衝(chong) 離子強度不均新鮮配製Running Buffer

轉印後信號弱甲醇濃度過高（＞20%）降低至10%甲醇

凝膠熔融電流過高/冷卻失效檢查冷卻循環係統

四、技術問答（Q&A）

Q1：能否用於(yu) 非變性蛋白電泳？

需改用 Native PAGE緩衝(chong) 液套裝（Cat. 1610738），並取消SDS

Q2：最小檢測蛋白量？

配合高敏發光底物（如Clarity Max）可檢測 0.5 pg/band

文檔優(you) 化建議：

插入 【電泳-轉印工作流程圖】 標注關(guan) 鍵參數

添加 緩衝(chong) 液配方二維碼（鏈接至Bio-Rad數據庫）

關(guan) 鍵步驟用 ⚠️警示框 強調（如"勿使用氯化鈉緩衝(chong) 液"）