——適用於(yu) 熒光定量PCR的高性能米兰快乐五彩票
Eaivelly透明八聯管(貨號:EA0202-2)是一款專(zhuan) 為(wei) 熒光定量PCR(qPCR)設計的高精度米兰快乐五彩票,采用超薄壁聚丙烯(PP)材質,搭配光學平蓋,兼容Roche480、ABI7500、Bio-Rad CFX96等主流PCR儀(yi) 器。其核心優(you) 勢包括:
超薄壁設計:熱傳(chuan) 導效率提升20%,控溫精度達±0.1℃,顯著縮短實驗循環時間。
無菌保障:經γ射線輻照滅菌,無DNase/RNase、無熱源、無內(nei) 毒素,避免樣本汙染。
光學性能:透明平蓋透光率≥95%,確保熒光信號采集無衰減。
指標 | 參數 |
---|---|
材質 | 醫用級聚丙烯(PP) |
容量 | 0.2 mL/孔 |
包裝規格 | 125套/盒,10盒/箱 |
適用機型 | Roche480、ABI7500、Bio-Rad CFX96等 |
儲存條件 | 常溫避光,有效期24個月 |
價格(參考) | 6500元/箱(10盒) |
樣本製備
提取DNA/RNA後,使用Nanodrop檢測濃度,確保模板濃度在10-100 ng/μL範圍內(nei) 。
避免反複凍融樣本,建議分裝後-80℃保存。
試劑混合
按實驗需求配製PCR反應體(ti) 係(如2×SYBR Green Master Mix、引物、模板DNA),渦旋混勻後離心。
引物設計需避免二聚體(ti) 形成,建議Tm值相差≤2℃。
加樣與(yu) 密封
使用8道移液器將20 μL反應體(ti) 係均勻分配至八聯管各孔,避免氣泡產(chan) 生。
輕壓光學平蓋至貼合,確保密封性。
PCR程序設置
預變性:95℃ 5分鍾
循環階段:95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(40個(ge) 循環)
溶解曲線:60℃→95℃,每0.5℃采集一次熒光信號
數據分析
使用Bio-Rad CFX Manager或Roche LightCycler軟件分析Ct值和熔解曲線。
閾值設定建議為(wei) 基線標準差的10倍。
基因表達分析:如miRNA、lncRNA的定量檢測。
病原體(ti) 檢測:新冠、流感病毒核酸的熒光定量PCR。
分子診斷:腫瘤標誌物(如KRAS、EGFR)突變篩查。
兼容性測試
在Roche480和ABI7500儀(yi) 器上分別運行標準曲線實驗,Ct值偏差≤0.3。
熱傳(chuan) 導性能
與(yu) 普通八聯管對比,Eaivelly八聯管在95℃變性階段升溫速率提升15%(數據來源:上海易匯生物實驗室)。
無菌驗證
經第三方機構檢測,無菌率達100%,無DNase/RNase殘留。
防止汙染
實驗前使用75%乙醇擦拭操作台麵,避免使用含氯消毒劑。
移液器吸頭需使用帶濾芯的型號。
避免交叉汙染
不同樣本間更換移液器槍頭,禁止重複使用。
光學平蓋不可重複使用,每次實驗需更換新管。
儲(chu) 存條件
未開封的八聯管需避光保存於(yu) 幹燥環境,避免高溫高濕。
Q:熒光信號強度偏低如何解決(jue) ?
A:檢查光學平蓋是否貼合緊密,或更換透光率更高的品牌耗材。
Q:出現非特異性擴增如何優(you) 化?
A:提高退火溫度至62-65℃,或調整引物濃度至0.2-0.4 μM。
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代理政策:支持區域代理,提供市場推廣資料及試用裝支持。
通過本指南,科研人員可高效利用Eaivelly透明八聯管開展熒光定量PCR實驗,確保數據準確性和重複性。如需進一步技術支持,請聯係供應商獲取定製化解決(jue) 方案。